Citogenética em quelônios Tiago Lucena da Silva

Introdução

Introdução Criptodira: Pleurodira: Testudinoidea, Trionychoidea e Chelonioidea Pleurodira: Chelidae e Pelomedusidae

Introdução

Chelonoidis carbonaria

C. carbonaria X C. denticulata

Geochelone hesterna ( Aufemberg 1971)

Morfologia

Citogenética Cromossomos de aves e répteis são muito variáveis em termo de tamanho e morfologia,caracterizando-se por cariótipos assimétricos, composto por macro e microcromossomos Cariótipo de quelônios apresentam grande quantidade de microcromossomos, variando a proporção dos mesmos entre os grupos, apresentam grande variação do n cromossômico, podendo ser encontrado de 26 até 96 cromossomos

Material e métodos 1. É coletado 3 a 5 ml de sangue venoso (arterial) em seringa heparinizada com o máximo de assepsia. 2. Semeado 1 ml de sangue no meio de cultura de cariótipo em ambiente asséptico em fluxo laminar. Composição do meio de cultura Meio de cultura Soro bovino fetal Antibióticos Fitohemaglutinina 3. O meio de cultura é mantido em estufa à 37ºC por 72 horas. 4. Duas horas antes de completar as 72 horas , adicionar duas gts. de colchicina . 5. Completar 72 horas na estufa. 6. retirada da cultura.

Material e métodos

Bandamentos cromossômicos Detectar alterações cromossômicas Parear os cromossomos homólogos Elaborar mapas cromossômicos por meio da técnica de FiSH Comparar cariótipos de espécies próximas buscando detectar possíveis rearranjos cromossômicos averiguar as mudanças produzidas pelo processo evolutivo

Bandamento G Segmentos cromossômicos que se condensam mais cedo na prófase (bandas escuras) Segmentos cromossômicos que se condensam mais tarde na prófase (bandas claras)

Bandamento G Bandas G - Claras Dna rico em citosina e guanina Muitos genes Bandas G- Escuras Dna rico em adenina e timina Poucos genes

Bandamento C Localiza a heterocromatina constitutiva Solução de Hidróxido de bário (Básica) Solução salina a alta temperatura Fragmentação do DNA cromossômico (Eucromatina) Bandas escuras correspondentes a heterocromatina

AG-NOR Regiões responsáveis pela transcrição de RNA ribossomal Marca apenas as RONs que foram transcritas durante a interfase anterior a metáfase analisada Pode não demonstrar todas as RONs Estudos de comportamento nucleolar durante o ciclo celular

AG-NOR

FISH / HIBRIDAÇÃO IN SITU-HIS CMA3

Material e métodos metacentrico Submetacentrico Acrocentrico

Perguntas ?