O segredo da Vida...
Watson e Crick
A=T C=G
DNA se replica Originando duas moléculas filhas iguais.
Como copia...
Replicação de DNA
Ligação fosfodiester A reação de polimerização é feita pela DNA polimerase e necessita de nucleotídeos trifosfatos, uma extremidade “primer” ou iniciadora, que possui a hidroxila 3’ livre e um molde ou “template” para ser copiado.
“Bolha” de replicação
Replicação unidirecional gera fragmentos: Fragmentos de Okazaki
DNA polimerase I tem função editorial
Seqüenciamento de DNA Princípios
Reação com ddNTP
Produtos da reação
Leitura da seqüência
Genoma de S. cerevisae Drosophila melanogaster Caenorhabditis elegans 6200 genes 12.147.813 nucleotídios Drosophila melanogaster Caenorhabditis elegans Terminado em 2000
Fluxo da informação
Transcrição
RNA polimerase é a enzima responsável pela transcrição
Sítios de reconhecimento
Tradução necessita de adaptador
Que funciona pela complementariedade
Complementariedade
Estrutura do DNA Complementariedade
Ligação cooperativa quando rompida o efeito é marcante.
Estrutura da água
Pontes de hidrogênio
Evaporação de água ? D no. de bolhas Temperatura oC
Evaporação de água D no. de bolhas Temperatura oC curva de transição
Estrutura do DNA Complementariedade
Desnaturação de DNA % desnaturação T’m Temperatura oC
Conteúdo de CG
Desnaturação de DNA % desnaturação Temperatura oC T’m
Desnaturação em função do conteúdo de GC %CG T’m
Hibridação Calor ou pH = desnaturação
Reassociação Temperatura e força iônica
Reassociação depende da concentração das seqüências Cot
A velocidade de reassociação depende da complexidade do DNA Cot
Três classes de seqüências de DNA Cot % reassociação