UBAIII Biologia Molecular Bioogia Molecular 1º Ano 2015/2016

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Sumário:  Capítulo III. Transcrição  Aspectos gerais da transcrição  Características gerais das RNA polimerases  Reacções de adição de nucleótidos  O processo da transcrição  Em bactérias  Em eucariotas 2

Fluxo de informação numa célula eucariota 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC3

Aspectos gerais da transcrição – bactérias 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC4

Aspectos Gerais da transcrição 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC5

Aspectos Gerais da transcrição 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC6

Métodos para estudar a transcrição 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC7

Transcrição em bactérias 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC8

Transcrição em bactérias 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC9

Transcrição em bactérias 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC10

Transcrição em bactérias 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC11

Transcrição em eucariotas 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC EnzimaRNA sintetizado RNA polimerase IrRNA (28S, 18S, 5,8S) RNA polimerase IImRNA, snRNA, snoRNA, microRNA, RNA telomérico RNA polimerase IIItRNA, 5S rRNA, U6 snRNA e outros pequenos RNAs RNA polimerase IV,V (apenas em plantas) siRNA 12

Comparação das RNA polimerases 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC13

Bibliografia 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC  Capítulo 5 secção 5.1 e 5.2. Capítulo 29 e Capítulo 13

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Sumário:  Capítulo IV. Síntese e processamento do RNA ribossomal e de transferência a. Síntese e processamento dos percursores de rRNA b. Síntese e processamento do 5S rRNA c. RNA de transferência 15

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RNAs  mRNA  tRNA  rRNA  Todos são processados antes da forma madura (funcional) 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC17 Unidade de Transcrição RNA polimerase Transcripto primário Associação com proteínas snoRNA snoRNP RNA funcional Rea- ções de “cut & paste”

Transcrição do rRNA eucariota  > 80% do RNA da célula.  Unidades de transcrição aglomeradas em 5 “clusters” repetitivos em cromossomas diferentes.  Visíveis na interfase celular como nucléolos 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC18

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Transcrição de rRNA 19

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Constituição do ribossoma eucariota 20

7/out/2015 UBAIII e Biologia Molecular MJC T03 21 Unidades Svedberg e rRNA Subunidade Ribossómica Coeficiente de Sedimentação Nº de nucleótidos Grande28S5 000 Pequena18S2 000 Grande5.8S160 Grande5S120

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Transcrição de rRNA 22

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Metilação e Alteração da uridina 23 Os transcriptos 1ºs de rRNA são diferentes: Pseudouridina (cerca de 95) Grupos metilo (mais de 100)

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Processamento do rRNA 24

snoRNAs 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC25 snoRNA RNA alvo snoRPs (Box C/D)C/D (Box A/H)

snoRNAs  Existem mais de 200 moléculas diferentes específicas para cada alteração.  De onde originam os snoRNAs?  São codificados nos intrões dos genes. 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC26

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Metilação e Box C/D snoRNAs 27

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Pseudouridinação e Box A/H snoRNAs 28

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Montagem das subunidades do Ribossoma 29 No nucléolo

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Síntese e processamento do 5S rRNA  Síntese fora do nucléolo  Genes em repetições tandem mas fora do nucléolo  Transcrito pela RNA polimerase III  Reconhecimento do promotor dentro da zona transcrita  Após transcrição é trazido para o nucléolo para sofrer processamento e ser montado o ribossoma. 30

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC RNA polimerase III  Transcreve tRNA e snoRNAs além do 5S RNA  No caso dos snoRNA o reconhecimanto é diferente - é a montante da zona transcrita 31 II  Quais os efeitos de apagar 1?  Quais os efeitos de apagar II?  Quais os efeitos de alterar a posição de II? I

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Genes de tRNA  Há cerca de 50 genes de tRNAs em células animais  Repetidos cerca de 1300 vezes em humanos 32

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC Processamento de tRNA 1. Corte do transcripto primário 1. Ribonuclease P 2. Splicing de intrões 3. Adição do tripleto CCA no terminal 3’ 4. Modificação de bases 33

Bibliografia 7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC34  Capítulo 5 secção 5.3 Capítulo 30 Capítulo 13