Biologia Molecular Básica e Aplicada

Apresentação em tema: "Biologia Molecular Básica e Aplicada"— Transcrição da apresentação:

1 Biologia Molecular Básica e Aplicada
Primeira Oficina de Trabalho das Redes Nacionais de Laboratórios Dra. Maria Inês de Moura Campos Pardini Pesquisadora do Depto. de Clínica Médica da FMB Responsável pelo Lab. de Biologia Molecular do Hemocentro-Botucatu

2 SEQUENCIAMENTO H A* T* C* G*

3 SEQUENCIAMENTO T* GAC TGAAGCTGTTCTG* CTGACTTCGACAAGACTAAA TGAAGC*
TGAAGCTGTTCTGATTT*

4 SEQUENCIAMENTO T* T* T* T* GAC TGAAGCTGTTATG* GAC TGAAGCTGTTCTGATTT*

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13 SEQUENCIAMENTO Eletroforese DNA Fita Simples Complementaridade de
3’ ’ 5’ 3’ 3’ 5’ Fragmentos maiores Fragmentos menores 3’ ’ Complementaridade de Cadeias

14 SEQUENCIAMENTO

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17 A DETECÇÃO DE MUTAÇÕES NO
GENÓTIPO VIRAL GENOTIPAGEM

18 AIDS

19 GENOMA DO HIV Genes Estruturais Genes Regulatórios

20 TRANSCRIPTASE REVERSA
HETERODÍMERO P51 450 aa P66 560 aa

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22 RNA cDNA cDNA DNA

23 PROTEASE Asp – Thr - Gly

24 CICLO REPLICATIVO

25 TRATAMENTO FASES PRECOCES INIBIDORES DA PROTEASE FASES TARDIAS
TRANSCRIPTASE REVERSA FASES PRECOCES INIBIDORES DA PROTEASE FASES TARDIAS INIBIDORES DA PROTEASE

26 VÍRUS SELVAGEM (WILD TYPE)
RESISTÊNCIA VÍRUS SELVAGEM (WILD TYPE) VÍRUS MUTANTE MUTAÇÕES SILENCIOSAS ALTERAÇÕES DE AA

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28 FENOTIPAGEM GENOTIPAGEM
RESISTÊNCIA FENOTIPAGEM GENOTIPAGEM

29 INT PR TR

30 Extração de RNA RT- PCR Extração de DNA PCR

31 Reação em cadeia da Polimerase
PCR DNA genômico Taq polimerase Primers Tampão dCTP dATP dGTP dTTP 72ºC 57ºC 94ºC

32 NESTED PCR TR NESTED PCR PR PRODUTO DA PCR

33 REVELAÇÃO

34 SEQÜENCIAMENTO Descrita por Sanger et al em 1977 nucleotídeo análogo
PCR Dideoxinucleotídeo

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39 SEQUENCIAMENTO AUTOMÁTICO

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45 Arte gráfica: Adriana, Rejane, minhas alunas.

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