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Cultura de fatias de Glândula Supra-Renal
Avaliação da qualidade estrutural pelos efeitos de condições externas Filipa Silva Helena Maia
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Objectivo do trabalho As GSR podem ser usadas em cultura mas requerem condições muito particulares, uma das quais é a presença de soro. Na ausência deste, as células perdem viabilidade o que se pode verificar pelas suas modificações estruturais. Questão: Qual é o efeito da privação de soro acrescentado, na ultra-estrutura das GSR em cultura?
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Material e métodos Dia 1 : Rato Wistar sacrificado por decapitação
Colheita das GSR e sua descapsulação
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Material e métodos Dia 1 :
Incubação de fragmentos da cápsula com parênquima subcapsular (CP) e de fatias da glândula restante (maioritariamente composta por ZF) Meio: DMEM/HAM´S F-12 em estufa a 37 ºC com CO2 a 5 % durante 24h (acrescentado de antibiótico e soro bovino fetal)
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Material e métodos Dia 2:
Colheita de fragmentos e processamento para ME. Distribuição dos fragmentos restantes por meio semelhante ao anterior com soro bovino fetal (B1) ou sem soro (B2). ZF + meio + soro 10% ZF + meio + antibiótico 1% antibiótico 1% B1ZF B2 ZF
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Material e métodos Dia 3 Colheita de fragmentos de B1 e B2 para ME;
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Resultados
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Resultados B1 ZF B2 ZF
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Comentários Em experiências anteriormente efectuadas os meios tinham acidificado e estavam contaminados por fungos filamentares. Nas experiências actuais, os estudos morfológicos mostraram acentuada destruição celular. Embora não se observassem as formas filamentares referidas, admitimos que a contaminação fúngica por formas mais primitivas tenha ocorrido e privado as células dos nutrientes.
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Comentários É de admitir uma maior sensibilidade das células da ZF à variação das condições do meio. Mais experiências serão necessárias para o confirmar.
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Comentários No futuro será necessário prosseguir com práticas laboratoriais muito precisas, a saber: Rapidez e rigor na execução de todos os procedimentos de preparação de material biológico; Cuidados assépticos e higiénicos rigorosos; Minimização da possível infestação fúngica.
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Autoras:
