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PublicouKaíque Mina Alterado mais de 9 anos atrás
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Transporte e Congelamento de Sêmen M.V. PhD. Adriana Pires Neves Medicina Veterinária – URCAMP Reprolab - UFRGS
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Conservação do Sêmen Retirar a fração gel
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Filtragem Através de uma gaze estéril ou filtros
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Após a diluição Estocagem no próprio frasco Diluidor - +5oC - Geladeira Todas as células em contato com o diluente Tubos Rotação
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Tipos de Estocagem Anaeróbica Aeróbica –temp ambiente (da Europa…)- INRA 96 Sem diferença na fertilidade
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Temperatura Crítica +20oC a + 5oC Choque térmico Danos à membrana do spz.
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Taxa de Resfriamento Até 20 o C Rápido 20 o C até 8 o C Lento <0,3 o C/min 8 o C até 5 o C Rápido
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Transporte de Sêmen Recuperação Temperatura até destino – próxima a +5oC Vários tipos comerciais de containers Permanentes ou descartáveis (ambiente)
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Tipos de Transporte Boa comunicação entre as bases Identificação do sêmen Transporte aéreo ou rodoviário – prós e contras
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Sêmen Congelado
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Vantagens Banco genético Animais em campanha esportiva Mercado global Menos transporte de animais e conseqüente risco Controle sanitário
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Desvantagens Má congelabilidade Menores taxas de fertilidade Menor tempo de vida do spz Maior custo da IA
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Passos para congelar Aumento de concentração Diluição em solução crioprotetora Envasamento Congelamento Descongelamento Inseminação
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Aumento de Concentração Coleta Fracionada – 10% do plasma seminal
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Centrifugação <2% plasma Concentrações <300x10 6 esp. Diluição 1+2 –EDTA – Glicose Centrifugação –700 a 1000g/5min
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Centrifugação Retirar o sobrenadante em um único movimento
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Proteger durante a centrifugação, curva de resfriamento e descongelamento Diluente de Martin Diluição Lactose 11%50 ml EDTA – glicose25 ml Gema25 ml Glicerol5%
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Diluente INRA 82 –Glicose 5g –Lactose 300mg –Rafinose 300mg –Citrato Trisód. dihid. 60mg –Citrato K82mg –Hepes 952mg –Água 100ml –Leite UHT desn.100ml –Penicilina 1UI/ml –Gentamicina 0,1 g/ml
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Outros Diluentes Vidament et al. 2002 –Inra 82 + 2% gema + 3% glicerol –Inra 82 + 2% gema + 2% glicerol –Inra 82 + 2% gema + 2% Dimetil formamida Papa et al. 2002 –Inra 82 + 5% Dimetil formamida
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Envasamento Pellets Macrotubos 4 ml Palhetas 0,5ml Palhetas 0,25ml
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Envasamento Palhetas e Macrotubos –50x106 espermatozóides/ml Pellets –Diluição 1+2 Congelamento
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Palhetas e Macrotubos 20 minutos a 4 cm do espelho de N 2
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Congelamento Velocidade de congelamento +20 o C a +5 o C = –5 o C/min +5 o C a -15 o C = –10 o C/min -15 o C a –150 o C = –25 o C/min
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Congelamento Deposição em Nitrogênio Líquido (-196 o C)
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Descongelamento Pellets –37 o C leite desnatado Palhetas –37 o C /30s Macrotubos –50 o C 40s
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Dose Inseminante Até 1980 –200x10 6 espermatozóides Após 1980 –400 a 500x10 6 espermatozóides
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Inseminação Controle folicular rigoroso- 6 em 6 h IDEAL: -2h antes ou após a ovulação Possível -12 h antes ou 6h após a ovulação
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Inseminação intracornual profunda
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Endoscopia Pipeta 0,2 a 0,02ml 5x10 6 spz
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Muito obrigada!!
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