Carregar apresentação
A apresentação está carregando. Por favor, espere
PublicouMatheus Mancha Alterado mais de 10 anos atrás
1
Identificação e estudos funcionais de genes de resistência à patógenos e pragas induzidos por ácido jasmônico em cana-de-açúcar Introdução Cana de açúcar cultivada em cerca de 127 países subtropicais e tropicais Brasil responsável por 25% da produção mundial São Paulo responsável por metade da produção brasileira
2
Proteínas (conhecidas) induzidas por AJ
Ácido Jasmônico Sintetizado pela planta em condições de estresses biótico e abiótico Proteínas (conhecidas) induzidas por AJ Inibidores de proteinases (IPs) PR-6 Inibidores de carboxipeptidases Defensinas Tioninas Proteínas inativadoras de ribossomos (RIPs) Ciclofilinas (CyPs) Glicoproteínas ricas em hidroxiprolina (HRGP) PR-1 (antifúngica), PR-2 ( -glucanase) e PR-3 (Chitinase) e PR-5 (taumatina) Proteínas PR :
3
Objetivo Utilizar a tecnologia de DNA macroarrays para detecção de expressão diferencial de genes em plantas de cana-de-açúcar tratadas com ácido jasmônico
4
Biossíntese do ácido jasmônico
Início após a ativação de receptores localizados na membrana celular Estes conduzem à ativação de fosfolipases que realizam a liberação do ácido linolenico das membranas enzima-chave que controla a transição entre compostos de 18C para 12C. (Schaller & Weiller, 1997). composto OPDA (ácido 12-oxo-fitodienóico) produzido após a ação da redutase de OPDA
5
Proteínas (conhecidas) induzidas por AJ
Inibidores de proteinases (IPs) PR-6 Inibidores de carboxipeptidases Defensinas Tioninas Proteínas inativadoras de ribossomos (RIPs) Ciclofilinas (CyPs) Glicoproteínas ricas em hidroxiprolina (HRGP) PR-1 (antifúngica), PR-2 ( -glucanase) e PR-3 (Chitinase) e PR-5 (taumatina) Proteínas PR :
6
Sistemina Receptor Em solanáceas peptídeo de 18 aminoácidos
liberado em locais afetados por insetos ou ferimentos envolve síntese do ácido jasmônico (Ryan & Pearce, 1998) considerado o primeiro polipeptídio-hormônio, regulando a ativação de mais de 20 genes de defesa em resposta à patógenos e pragas, incluído genes que codificam inibidores de proteases (IPs) (Ryan, C.A., 2000) Contua sendo só em solanéceas Receptor Ácido jasmônico : resposta típica de um receptor ( Não conhecido )
7
Tratamentos Pulverização da parte aérea com MJ (100 M) em BOD
6 plântulas / tratamento Extração de RNA e preparo das sondas de cDNA: Tratamento Tempo de exposição 1 Controle 2 15 min 3 30 min 4 60 min 5 3 h 6 6 h 7 12 h
8
Macroarray Tratamento A Tratamento B RNA total A RNA total B
cDNA Probe A cDNA Probe B
9
Resultados Expressão diferencial Trat 4.1 Trat 4.7 Controle
12 h após pulverização
10
“Scatter-Plot” – Perfil de indução dos genes
( Controle x AJ 12 h )
11
Cinética da expressão dos genes induzidos
Agrupamento de perfis de expressão
14
PAL
15
Desconhecida
16
Proteína Quinase
17
O2 H2O2 H2O 100 M JA (exógeno) Parede celular ligninificação Membrana
plasmática Peroxidase Desaturase Influxo de Cálcio LA LOX ? PLA2 PKC Calnexina AOS PKC Fitoalexina PAL JA Catalase O2 SOD H2O2 VSPs ? H2O Núcleo ? Cloroplasto Kinase Fator transcripcional Indução de genes de defesa
18
- genes bem conhecidos serem induzidos por AJ ( Ex. PAL, VSP, etc.)
Conclusões Detectamos: - genes bem conhecidos serem induzidos por AJ ( Ex. PAL, VSP, etc.) genes recentemente descobertos serem induzidos por MJ (HSPs) novos genes de função desconhecida
19
Prospecto futuro c) Confirmar a expressão de genes identificados por "Northern blot"; e) Analisar as seqüências, objetivando a busca de domínio conservados f) Superexpressar os genes selecionados em tabaco, objetivando determinar suas possíveis funções.
20
O2 H2O2 H2O 100 M JA (exógeno) Parede celular ligninificação
Membrana plasmática Peroxidase Desaturase Influxo de Cálcio LA LOX ? PLA2 PKC Calnexina AOS Fitoalexina PAL JA Catalase O2 SOD H2O2 VSPs ? H2O Núcleo ? Cloroplasto Kinase Fator transcripcional Indução de genes de defesa
Apresentações semelhantes
© 2024 SlidePlayer.com.br Inc.
All rights reserved.