Microscopia de fluorescência in vivo Ana Leal - 65084 Catarina Simões - 65090 Joana Lourenço - 65101 Tutor: Prof. José Rino.

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1 Microscopia de fluorescência in vivo Ana Leal - 65084 Catarina Simões - 65090 Joana Lourenço - 65101 Tutor: Prof. José Rino

2 O que é a microscopia de fluorescência in vivo? Que problema queremos resolver? O que já fizemos e o que vamos fazer? Microscopia de fluorescência in vivo

3 Apresentação do tema e conceitos base Breve visita aos microscópios presentes no IMM Estruturação do trabalho, através da introdução de uma situação problema Reuniões com o tutor 27 de Outubro6 de Novembro11 de Novembro

4 O que é a microscopia de fluorescência? Técnica de microscopia óptica que usa a fluorescência Permite visualizar as células num organismo vivo Expressão génica Permite visualizar proteínas dentro de células Dinâmica de proteínas Uso de proteína fluorescente (GFP) Microscópios modernos Breve referência a técnicas de microscopia

5 Usados na microscopia de fluorescência: Microscópios: Células do Endotélio

6 Situação – Problema:  Como visualizar e estudar a cinética da Expressão Genética (nomeadamente Splicing) dentro de células vivas com a maior resolução espacial e temporal? Conceitos: Síntese proteica Técnicas de imagiologia dinâmica de fluorescência Síntese proteica

7 Objectivos: Descobrir quais as técnicas que melhor se adaptam à resolução do nosso problema Conhecer a abordagem actual usada no IMM Estudar métodos e técnicas de microscopia alternativas Estudar as limitações da tecnologia existente Identificar possíveis sistemas inovadores

8 Bibliografia: Evanko, Daniel, Focus on fluorescence imaging in Nature Methods 901, Vol.2 Nº.12, December 2005 Evanko, Daniel, Seeing is believing in Nature Methods 889, Vol.2 Nº.12, December 2005 Rino, José, Imaging gene expression inside living cells, VI Meeting of Biomedical Engineering IST-FMUL SHAV- TAL, Yaron, SINGER, Robert H., DARZACQ, Xavier, Imaging gene expression in single living cells in Nature Reviews, 856-862, Vol.5, October 2004

9 WEGERHOFF, Rainer, WEIDLICH, Olaf, KÄSSENS, Manfred, Basics of Light Microscopy & Imaging in Special Edition of Imaging & Microscopy ABRAMOWITZ, Mortimer, Microscope Basic and Beyond in Volume 1, Revised 2003, Basics and Beyond Series CONCHELLO, José-Angel, LICHTMAN, Jeff W., Optical Sectioning microscopy in Nature Methods, 920-931Vol 2, Nº12 December 2005 EILS,Roland, ATHALE, Chaitanya, Computational imaging in Cell Biology in The Journal of Cell Biology 477-481 Vol.161 Nº3,2003 STEPHENS,David J., ALLAN, Victoria J., Light Microscopy Techniques for Live Cell Imaging in SCIENCE, Vol 300, 4 April 2003 WILLING, Katrin I, KELLNER Robert R, MEDDA, Rebecca, HEIN, Birka, JAKOBS, Stefan, HELL Stefan W., Nanoscale resolution in GFP-based microscopy in Nature Methods 721-723, Vol.3 Nº.9 September 2006 YUSTE, Rafael, Fluorescence microscopy today in Nature Methods, 902-904 Vol. 2 Nº12, December 2005 CONCHELLO, José-Angel, LICHTMAN, Jeff W., Fluorescence microscopy in Nature Methods, 910-919 Vol 2, Nº12 December 2005

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