GASTROENTERITES VIRAIS Lígia Galhardi Laboratório de Virologia Dep. Microbiologia/CCB/UEL
Infecção viral X doença Vírus que infectam o intestino? Infecção viral X doença Associados a G-E: Rotavirus Adenovirus entéricos (40, 41, 50 e 51) Calicivirus Astrovirus Coronavirus Torovirus Não associados a G-E Polio Coxsackie A e B Echovírus Enterovírus 68-71 Hepatite A e E Adenovírus 1-39 Reovírus
Mais comuns: Adenovírus Astrovírus Rotavírus Calicivírus Norovírus - Norwalk Calicivírus Sapovírus
Epidemiologia: Distribution of case-patients with A) community-acquired versus B) healthcare-associated acute gastroenteritis (AGE) in whom a virus was detected, by ward category and virus detected, Alder Hey Hospital, Liverpool, UK, 2006–2007. Rates were calculated as numbers of cases per 1,000 admissions to each ward throughout the study and are shown for each virus tested, with a comparison of all cases where at least 1 virus was detected (diamonds). Cunliffe, N.A., et al. 2010. Healthcare-associated Viral Gastroenteritis among Children in a Large Pediatric Hospital, United Kingdom. Vol. 16, No. 1.
Epidemiologia:
Epidemiologia: Kane EM, Turcios RM, Arvay ML, Garcia S, Bresee JS, Glass RI. The epidemiology of rotavirus diarrhea in Latin America. Anticipating rotavirus vaccines. Rev Panam Salud Publica. 2004;16(6):371–7.
GASTROENTERITES VIRAIS ROTAVÍRUS Família – Reoviridae Diâmetro: 65-75 nm 7 grupos (A, B, C) - subgrupos e sorotipos Virion: Core (proteínas VP1, VP2 e VP3) Capsídeo interno (VP6 - grupos) Capsídeo externo (sorotipos) VP7 - Sorotipo G (14) VP4 - Sorotipo P (12)
ROTAVÍRUS Classe I Classe II Classe III Classe IV Ácido Nucléico – RNA df segmentado (11 genes) – 16.500 - 21.000 pb Classe I Classe II Classe III Classe IV
REPRESENTAÇÃO ESTRUTURAL DO ROTAVÍRUS
ROTAVÍRUS Modulação de Ca intracelular
Classificação fenotípica (eletroforétipos) dos Rotavírus Mutações ou rearranjos
Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus grupo A Sorotipos (neutralização ou EIA) e genótipos (RT-PCR); (Proteólise) (Glicosilação)
Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus já descritos 1) Cepas mais comuns: G1P1A[8], G2P1B[4], G3P1A[8] e G4P1A[8] – (92% casos humanos). 2) Cepas circulantes no Brasil: G5, G8, G10, G12 E P3. 3) Cepas já identificadas em áreas em desenvolvimento: G3P8[11], G4P6[1], G4P8[11], G5P2A[6], G5P1A[8], G1P1A[8], G6P3[9], G6P11[14], G8P6[1], G1P1A[8], etc.
EPIDEMIOLOGIA - Sorotipos R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8
Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus grupo A (Soares LS, et al. Molecular characterization of G1 human rotaviruses detected in children from Belém, Pará, Brazil. Rev Pan-Amaz Saude 2010; 1(1):125-130): G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[8] and G9P[8]. R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8
VACINA No Brasil
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Material: fezes Coleta: entre o 1º e o 4º dia Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica Pesquisa de Antígeno Viral: Imunofluorescência Enzimaimunoensaio Aglutinação em Látex Eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) PCR
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica detecção dos RV em 80 a 90 % das fezes positivas
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Imunoensaio enzimático
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Imunocromatografia
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Aglutinação em látex
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL EGPA
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL PCR
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Isolamento do vírus em célula: - rim de macaco (MA-104 e LLC-MK2) e de carcinoma de cólon intestinal humano (Caco-2). ECP em MA-104: aumento de refringência, seguido de redução do volume citoplasmático, com formação de grumos celulares e células repuxadas, com distribuição focal Sorotipagem e neutralização
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL MA-104 cells, mock- (A, D and G), SA-11 (B, E and H) and 1154 (C, F and I) infected cells at 24, 48 and 72 hpi (lanes A, D and G), respectively