Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves

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Transcrição da apresentação:

Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves Danielle Ferraz Mello

O que é citometria de fluxo? Técnica utilizada para contar, examinar e classificar partículas microscópicas suspensas em um meio líquido em fluxo; Permite a análise de vários parâmetros simultaneamente.

Como funciona? Um feixe de luz (normalmente laser) de um único comprimento de onda (cor) é direcionado a um meio líquido em fluxo; Detectores vão receber a luz que atravessou (Forward scatter ou FSC) e a luz que foi desviada (Side scatter ou SSC) pela partícula ou célula.

Citômetro de fluxo Instrumento capaz de analisar várias parâmetros de várias partículas por segundo; Alguns podem ainda ativamente separar e isolar partículas com propriedades específicas. Principais componentes: Laser ou fonte de luz; Fluxo de células; Detector e conversor de sistema analógico para digital; Computador para análise dos sinais.

Citômetro de fluxo

Gráficos gerados: dot plot

Gráficos gerados: dot plot

Gráficos gerados: histogramas

Aplicações Hematologia; Cancerologia; Imunologia; Ciclo celular; Oceanografia; Muitas e muitas outras!!

10 µm Hemócitos São as células imunocompetentes que fazem parte do sistema imune dos invertebrados; Granulares e hialinos.

Hemócitos

Vamos à prática!!!

Resultados Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - DANI

Resultados Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - PATRÍCIA

Resultados Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - CILEIDE

Resultados Gráfico hemolinfa Crassostrea gigas - POOL