Isolamento e identificação dos Estafilococos

Importância Clínica dos Estafilococos Staphylococcus aureus Intoxicação alimentar (produção de enterotoxinas) Síndrome do choque tóxico Infecções hospitalares Osteomielite Endocardite Bacteremia MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina) VRSA (Staphylococcus aureus resistente à vancomicina) VISA (Staphylococcus aureus com resistencia intermediária à vancomicina) Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus

Abcessos

Síndrome da pele escaldada Toxina: Esfoliatina

Intoxicação alimentar

Síndrome do choque tóxico

Isolamento dos Estafilococos Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus

Identificação de Estafilococos 1) Prova da Catalase 2) Prova da Coagulase 3) Resistência à Novobiocina 4) Crescimento em ágar Manitol 5) Prova da DNAse

+ Prova da Catalase - Estafilococos Estreptococos Conversão de peróxido de hidrogênio a 3% em água e oxigênio pela ação da catalase. 2H2O2  H2O + O2 + Estafilococos - Estreptococos OBS: Cuidado para não coletar ágar sangue junto com a colônia usada no teste  falso positivo porque o sangue do agar contém catalase.

Prova da Catalase Staphylococcus spp Streptococcus spp

+ Prova da Coagulase Fibrinogênio  Fibrina - S. aureus Inocular colônia de bactéria em plasma de coelho  incubar 37 ºC por 1-4 horas e observar formação de fibrina S. epidermidis S. saprophyticus Fibrinogênio  Fibrina + - S. aureus

Prova da coagulase em tubo

Staphy test

Ágar Manitol (7,5% NaCl) Manitol salgado Sem Crescimento ou sem fermentação (rosa ou vermelho) Crescimento e fermentação (amarelo) S. epidermidis S. saprophyticus S. aureus

Ágar Manitol (7,5% NaCl)

Prova da DNAse Ágar DNAse S. aureus + - Semear uma colônia em ágar DNAse e incubar a 35 graus por 24 horas. No momento da leitura adicionar HCl 1N sobre a placa, aguardar 30 segundos e observar a formação de um halo claro ao redor da colônia. Ágar DNAse S. aureus + - S. epidermidis S. saprophyticus

PROVA DA DNAse

Prova de sensibilidade à Novobiocina Ágar Mueller-Hinton com disco de Novobiocina (5 microgramas) Sensível ( - ) Resistente (+) S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus

Tabela para identificação de cocos Gram + Catalase + (Staphylococcus spp.) Coagulase Manitol DNAse Novobiocina S. aureus + Sensível S. epidermidis - S. saprophyticus Resistente Todos são Catalase +

Identificação de MRSA Teste de sensibilidade à oxacilina Teste de sensibilidade à cefoxitina PCR para o gene mecA Detecção de PBP2a por aglutinação

Teste de sensibilidade à oxacilina e cefoxitina

PCR para mecA

Aglutinação – Slidex (Biomerieux)