Estrutura e identificação do Cariótipo Cromossomos Estrutura e identificação do Cariótipo Prof. Priscilla Russo Biologia - Farmácia

Cromossomo Filamentos espiralados de cromatina, composto por DNA e proteínas Durante o ciclo celular, os cromossomos passam por estágios ordenados de condensação e descondensação.

DNA - histonas

Estrutura Centrômero: constrição primária que divide o cromossomo em dois braços. É o ponto de ligação de cromátides irmãs Telômero: extremidade dos braços cromossômicos. Satélite: porção terminal do cromossomo separado por uma constrição secundária.

Centrômero Metacêntrico Submetacêntrico Acrocêntrico centrômero central braços aproximadamente iguais Submetacêntrico centrômero não central braços de comprimento diferentes Acrocêntrico centrômero próximo a extremidade

Centrômero Obs. Os cromossomos acrocêntricos humanos (13, 14, 15, 21, 22) possuem satélites

Sexuais e Autossomos

Técnicas de análise Citogenética: estudo dos cromossomos e sua estrutura

Os cromossomos de uma célula humana em divisão são mais facilmente analisados na metáfase. Nesta fase, os cromossomos estão dispersos e apresentam duas cromátides, unidas pelo centrômero.

Técnica Obtém-se uma amostra de sangue Centrifuga para os leucócitos sedimentarem Estes são colocados em meio de cultura e estimulados a dividir-se, com adição da fito-hemaglutinina, agente mitogênico (estimula mitose)

Técnica Incuba para multiplicação celular Acrescenta solução de colchicina, para impedir a conclusão da divisão celular (inibindo a formação do fuso e retardando a separação dos centrômeros) Então, as células paradas na metáfase acumulam-se na cultura

Técnica Em seguida, adiciona solução hipotônica para tumefar as células, lisando e liberando os cromossomos, mas mantendo-os intactos

Técnica Os cromossomos são fixados, espalhados em lâminas e corados por várias técnicas.

Bandeamento Vários métodos de bandeamento são utilizados nos laboratórios de citogenética para identificação e análise dos cromossomos Coloração convencional Bandeamento G Bandeamento R Bandeamento C

Coloração convencional

Bandeamento G Os cromossomos são tratados com tripsina (desnaturação de proteínas) e corados com Giemsa. Cada par de cromossomos cora-se num padrão típico de bandas claras e escuras.

Bandeamento G

Bandeamento G

Bandeamento R Os cromossomos recebem pré-tratamento com calor antes da coloração Giemsa. Nesse caso, as bandas claras e escuras resultantes (bandas R) são o inverso das produzidas por bandeamento G.

Bandeamento C Coloração da região centrômérica

Cariótipo

Masculino (15 cromossomos no grupo C e 5 cromossomos no grupo G)

Feminino (16 cromossomos no grupo C e 4 cromossomos no grupo G)

FISH "Chromosome Painting“ Detecta segmentos específicos de DNA, e um software de computador é capaz discriminar 27 diferentes tons.

FISH Permite detectar melhor os rearranjos cromossômicos complexos e simples e, ainda pode-se caracterizar muitas anormalidades cromossômicas que não eram detectadas pelas técnicas de bandeamento tradicionais.

FISH

Ex.: Sd. Edwards

Montagem do cariótipo (anexo) Atividades Montagem do cariótipo (anexo)

2. Analise o cariótipo e responda:

Qual é o tipo de bandeamento? Qual o sexo do paciente? Qual a síndrome destacada? Como representamos este cariótipo?

3. Este cariótipo é normal? ( ) Sim ( ) Não

4. Classifique os cromossomos Metacêntrico: Submetacêntrico: Acrocêntrico: