UBAIII Biologia Molecular 1º Ano 2014/2015

10/out/2013MJC Sumário:  Capítulo IV. Síntese e processamento do RNA ribossomal e de transferência a. Síntese e processamento dos percursores de rRNA b. Síntese e processamento do 5S rRNA c. RNA de transferência 2

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RNAs  mRNA  tRNA  rRNA  Todos são processados antes da forma madura (funcional) 10/out/2013MJC4 Unidade de Transcrição RNA polimerase Transcripto primário Associação com proteínas snoRNA snoRNP RNA funcional Rea- ções de “cut & paste”

Transcrição do rRNA eucariota  > 80% do RNA da célula.  Unidades de transcrição aglomeradas em 5 “clusters” repetitivos em cromossomas diferentes.  Visíveis na interfase celular como nucléolos 10/out/2013MJC5

10/out/2013MJC Transcrição de rRNA 6

10/out/2013MJC Constituição do ribossoma eucariota 7

10/out/2013 MJC T03 8 Unidades Svedberg e rRNA Subunidade Ribossómica Coeficiente de Sedimentação Nº de nucleótidos Grande28S5 000 Pequena18S2 000 Grande5.8S160 Grande5S120

10/out/2013MJC Transcrição de rRNA 9

10/out/2013MJC Metilação e Alteração da uridina 10 Os transcriptos 1ºs de rRNA são diferentes: Pseudouridina (cerca de 95) Grupos metilo (mais de 100)

10/out/2013MJC Processamento do rRNA 11

snoRNAs 10/out/2013MJC12 snoRNA RNA alvo snoRPs (Box C/D)C/D (Box A/H)

snoRNAs  Existem mais de 200 moléculas diferentes específicas para cada alteração.  De onde originam os snoRNAs?  São codificados nos intrões dos genes. 10/out/2013MJC13

10/out/2013MJC Metilação e Box C/D snoRNAs 14

10/out/2013MJC Pseudouridinação e Box A/H snoRNAs 15

10/out/2013MJC Montagem das subunidades do Ribossoma 16 No nucléolo

10/out/2013MJC Síntese e processamento do 5S rRNA  Síntese fora do nucléolo  Genes em repetições tandem mas fora do nucléolo  Transcrito pela RNA polimerase III  Reconhecimento do promotor dentro da zona transcrita  Após transcrição é trazido para o nucléolo para sofrer processamento e ser montado o ribossoma. 17

10/out/2013MJC RNA polimerase III  Transcreve tRNA e snoRNAs além do 5S RNA  No caso dos snoRNA o reconhecimanto é diferente - é a montante da zona transcrita 18 II  Quais os efeitos de apagar 1?  Quais os efeitos de apagar II?  Quais os efeitos de alterar a posição de II? I

10/out/2013MJC Genes de tRNA  Há cerca de 50 genes de tRNAs em células animais  Repetidos cerca de 1300 vezes em humanos 19

10/out/2013MJC Processamento de tRNA 1. Corte do transcripto primário 1. Ribonuclease P 2. Splicing de intrões 3. Adição do tripleto CCA no terminal 3’ 4. Modificação de bases 20

Bibliografia 10/out/2013MJC21  Capítulo 5 secção 5.3 Capítulo 30 Capítulo 13