Genética Molecular Licenciatura em Análises Clínicas e Saúde Pública Recombinação V(D)J: Os genes das Ig e do TCR Prof.Doutor José Cabeda

A codificação genética do TCR e Ig NECESSIDADE BIOLÓGICA: Criar um número ilimitado de TCR LIMITAÇÃO PRÁTICA: O Genoma é limitado, pelo que pode codificar um número limitado de Proteínas RESPOSTA BIOLÓGICA: O mecanismo de recombinação somática cria uma diversidade ilimitada a partir de um número limitado de elementos genéticos base 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Os receptores do antigénio são codificados por mais que um gene Cadeias Pesadas: IgH Cadeias Leves: Igl e Igk TCR Cadeia a Cadeia b Cadeia g Cadeia d 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Os genes das Imunoglobulinas Cromossoma 16 Cromossoma 6 Cromossoma 12 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Prof. Doutor José Cabeda Os genes do TCR 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Prof. Doutor José Cabeda Os genes do TCR são diferentes em células diferenciadas e células indiferenciadas 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Prof. Doutor José Cabeda O rearranjo somático 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Regulação da recombinação: as sequências sinal 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Regulação da recombinação A recombinação somática segue a regra: “ só rearranjam elementos com espaçadores de comprimentos diferentes”. 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Equação de recombinação 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Prof. Doutor José Cabeda Tipos de recombinação 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

As junções dos elementos V-D-J não são pré-definidas Delecção de nucleótidos de cada elemento Adição de novos nucleótidos Nucleótidos P (origem numa estrutura palindrómica) Nucleótidos N (adicionados aleatoriamente pela enzima TdT) número potencial de 1016 ab-TCR e 1018 gd-TCR 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

A origem dos nucleótidos P 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

A origem dos Nucleótidos N 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Leitura dos segmentos Db faz-se em 3 ordens de leitura 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Diversidade combinatorial 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Locais de diversidade de junção: os CDR 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Os CDR na estrutura proteica 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

A recombinação origina novos genes e novos clones Cada gene obtido é potencialmente diferente dos restantes Os genes do TCR de cada linfócito são diferentes dos de qualquer outra célula não linfóide A recombinação V(D)J ocorre precocemente na ontogenia das células determina a sua maturação na linhagem T cada célula origina um clone de células T 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Estimativas da diversidade 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Mutação somática dos genes das Ig Ocorre no centros germinais dos nódulos linfáticos Ocorre de forma aleatória A selecção dirigida pelo antigénio causa predominância de mutações nos CDR Resulta num aumento da afinidade dos anticorpos 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

O TCR não sofre mutação somática

O Gene TCR g no locus TCR a 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda

Aplicações no laboratório de análises clínicas 2002/2003 Prof. Doutor José Cabeda