Ativação Neuronal e c-Fos Ciclo de seminários do LCM 2011 Priscila Cassolla

Ativação Neuronal e c-Fos Introdução Ativação Neuronal e c-Fos Ativação neuronal Neurônios/Sinapses Comunicação celular Identificação das áreas cerebrais ativadas após um estímulo Localização da atividade neuronal Análise do RNAm c-fos ou da proteína c-Fos

Comunicação celular Neurônios Atividade Neuronal – Comunicação celular Hansen, J. T. & Koeppen, B. M. – Netter’s Atlas of human physiology

Comunicação celular Sinapses Atividade Neuronal – Comunicação celular http://www.mind.ilstu.edu/curriculum/neurons_intro/neurons_intro.php

Sinapses e expressão gênica Atividade Neuronal – Comunicação celular Sinapses e expressão gênica

Sinapses e expressão gênica Atividade Neuronal – Comunicação celular Sinapses e expressão gênica West, A. E. et al, 2002

c-Fos??? O que é c-Fos? Qual o papel fisiológico da c-Fos no neurôrio? Proteína c-Fos c-Fos??? O que é c-Fos? Qual o papel fisiológico da c-Fos no neurôrio? Por que c-Fos é um marcador de atividade neuronal? Como c-Fos é detectada?

O que é c-Fos? 380 aas 90% homologia com o oncogene v-Fos Proteína c-Fos O que é c-Fos?   380 aas 90% homologia com o oncogene v-Fos Retrovírus do Sarcoma murino osteogênico Finkel-Biskis-Jinkins Immediate-early gene (IEG) c-fos, c-jun e c-myc Fatores de transcrição

Qual o papel da c-Fos no neurônio? Proteína c-Fos Qual o papel da c-Fos no neurônio? Após dimerização com membros da família Jun (c-Jun, JunB e JunD), o dímero Fos/Jun liga-se à região AP-1 para promover ou inibir a transcrição de diversos genes (proliferação, diferenciação e apoptose) Zíper leu Aprendizado e memória? (FRAs e FosB)

Proteína c-Fos Clayton, D. F., 2000

Proteína c-Fos Chinenov, Y e Kerppola, T.K., 2001

Por que c-Fos é marcador de atividade neuronal? Proteína c-Fos Por que c-Fos é marcador de atividade neuronal? Não é expressa (ou pouco expressa) em condições basais – sem geração de potencial de ação; É rapidamente expressa em resposta aos sinais de superfície celular (estímulos externos); Expressão transitória com meia-vida mais curta do que os outros membros da família Fos; O estresse da eutanásia não interfere;

Por que c-Fos é marcador de atividade neuronal? Proteína c-Fos Por que c-Fos é marcador de atividade neuronal? A proteína c-Fos é nuclear, portanto permite estudos com dupla-marcação para identificação do fenótipo neuronal

Por que c-Fos é marcador de atividade neuronal? Proteína c-Fos Por que c-Fos é marcador de atividade neuronal? Kovács, K. J., 2008

Como c-Fos é detectada? RNAm da c-Fos Hibridização in situ Proteína c-Fos Como c-Fos é detectada? RNAm da c-Fos Hibridização in situ Proteína c-Fos Imunohistoquímica Clayton, D. F., 2000

Como c-Fos é detectada? RNAm da c-Fos Hibridização in situ Proteína c-Fos Como c-Fos é detectada? RNAm da c-Fos Hibridização in situ http://www.colorado.edu/intphys/Class/IPHY3730/image/figure6-9.jpg

Como c-Fos é detectada? Proteína c-Fos Imunohistoquímica http://www.komabiotech.co.kr/www/techniques/immunodection/immTechniques.html; Thaler, J. P. et al., 2009

Obrigada!