Análise de metabólitos

Apresentação em tema: "Análise de metabólitos"— Transcrição da apresentação:

1 Análise de metabólitos
Luís Fabiano Soares Smarra

2 O que é metabolismo????

3 Anabolismo x Catabolismo

4 Anabolismo x Catabolismo

5 Produção de energia (ATP)

6 Metaboloma Genoma DNA Transcriptoma RNA Proteoma Proteínas Metaboloma
Nucleotídeos Açúcares Aminoácidos Lipídios Metabólitos

7 Metaboloma Metabolômica é a identificação e a quantificação de pequenas moléculas do produto metabólico (o metaboloma) de um sistema biológico (organismo) em um específico momento do tempo. O metaboloma pode ser alterado: Ambiente (alimentação e hábitos de vida) Microflora (flora bucal e gastrointestinal) Genes (erros inatos do metabolismo) Metaboloma consiste de um mix de fatores endógenos e exógenos Wishart, D. S., et al., 2012

8 Existem numerosos metabólitos, e podem ser encontrados em:
Saliva Sangue Amostra de tecidos Urina Kobayashi, T.,et al., 2013; Beger, R., et al., 2006; Ganti, S., et al, 2011; Wang, Q., et al. 2014; Tian, Y., et al., 2015

9 Em quais exames rotineiros são verificados os metabólitos?

10 Metabolismo como alvo terapêutico
Mercaptopurina Fluoruracil Ambos impedem a síntese de DNA e leva a célula tumoral a morte INCA, 2016

11 Como estudar os metabólitos??

12 Ressonância magnética nuclear (RMN)
- Espectroscopia de RNM criada em 1940 Determinar estrutura, identificar e quantificar substâncias RMN de ¹H e ¹³C são os mais utilizados Spin nuclear α e β sob campo magnético

13 Ressonância magnética nuclear (RMN)
Análise: Amostra Tampão Fosfato DSS Água Água deuterada

14 Ressonância magnética nuclear (RMN)
1, Imidazol; 2, Uréia; 3,D-Glicose; 4, L-Ácido lático; 5, Glicerol; 6, L-Glutamina; 7, L-Alanina; 8, DSS; 9, Glicina; 10,L-Ácido glutâmico; 11, L-valina; 12, L-Prolina; 13, L-Lisina; 14,L-Histidina; 15, L-Treonina; 16, Propileno glicol; 17, L-Leucina; 18, L-Tirosina; 19, L-Fenilalanina; 20, Metanol; 21, Creatinina; 22, Ácido 3-Hidroxibutírico; 23, Ornitina; 24, L-Isoleucina; 25, Ácido cítrico; 26, Ácido acético; 27, Carnitina; 28, Ácido 2-Hidroxibutirico; 29, Creatina; 30, Betaína; 31, Ácido formico; 32, Álcool isopropil; 33, Ácido pirúvico; 34, Colina; 35, Acetona; 36, Glicerol Psychogios, N., et al., 2011

15 O Metaboloma Psychogios, N., et al., 2011

16 Identificação e quantificação
As diferenças surgem por diferentes razoes como: Diferenças de sensibilidade Métodos direcionados e não direcionados Estabilidade dos componentes Solubilidade dos componentes Volatilidade Etc Tratam-se, portanto, de técnicas complementares Psychogios, N., et al., 2011

17 METABOLOMA Os espectros necessitam de uma correção através de um software (CHENOMX NMR Suite 7.5) Possui um banco de dados próprio com mais de 200 espectros de metabólitos Para auxiliar na identificação banco de dados são utilizados (HMDB)

18 CHENOMX

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53 Atividade 01 Informe as posições dos picos de um dos seguintes metabólitos L- Alanine Ethanol Urea Formic Acid L- Tyrosine L-Phenylalanine L- Lactic Acid Creatine Pyruvic Acid Acetoacetic Acid

54 Atividade 02 Cite em quais biofluidos o metabólito escolhido é encontrado

55 Atividade 03 Cite qual o valor médio da concentração do metabólito encontrado no sangue em adultos de ambos os sexos

56 Atividade 04 Informe a “HMDB ID” do metabólito encontrado, a formula química, o nome tradicional e o nome de acordo com as regras da IUPAC

57 Atividade 05 Dê o nome de uma doença relacionada ao metabólito escolhido