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1 RADIOPROTEÇÃO Professor: Rodrigo Penna Departamento de Engenharia Nuclear CCTN - UFMG.

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1 1 RADIOPROTEÇÃO Professor: Rodrigo Penna Departamento de Engenharia Nuclear CCTN - UFMG

2 2 DOSIMETRIA BIOLÓGICA: MICRONÚCLEOS

3 Professor Rodrigo Penna Sítio na internet: Blog: Link para currículo no Sistema Lattes: s

4 4 A IDÉIA Ao fazer o estudo de um artigo na disciplina RADIOFÁRMACOS, surgiu a idéias de trabalhar com DOSIMETRIA BIOLÓGICA pelo método dos micronúcleos. Implementando a técnica em um trabalho preliminar, ela poderá ser utilizada, no CCTN, em vários outros trabalhos e estudos posteriores. Professor Rodrigo Penna

5 5 MÉTODO DO MICRONÚCLEO Origem- fragmentos acêntricos - cromossomos inteiros Tamanho- 1/20 a 1/5 do Ø do núcleo principal Indicadores - agentes clastogênicos - agentes aneugêncios Schmidt (1975) – células da medula óssea de camundongos Countryman e Heddle (1976) – relação quantitativa entre a dose e a frequência de MN em linfócitos humanos 205

6 6 Ilustração esquemática do mecanismo de formação de micronúcleos em células mononucleadas METÁFASE EFEITO GENOTÓXICO ANÁFASE CÉLULA NORMAL CÉLULA ANORMAL CÉLULAS -FILHAS NORMAIS CÉLULA FILHA NORMAL CÉLULA MICRONUCLEADA

7 7 Fenech & Morley (1985) – “cytokinesis block method” Citocalasina B – Helminthosporum dematoideum inibe a citocinese, mas não a carciocinese célula binucleada (1 divisão nuclear) Cultivo: adição de cito B, 44 horas após tratamento isotônico – preservação do citoplasma para cada dose – 500 células binucleadas Desvantagem- não oferece toda a informação - 10 a 12 MN / 1000 binucleadas Vantagens- relativamente simples e sensível - análise mais rápida - bom indicador de dano genético - magnitude do dano ocorrido Professor Rodrigo Penna

8 8 Ilustração esquemática do mecanismo de formação de micronúcleos em células binucleadas METÁFASE EFEITO GENOTÓXICO ANÁFASE CÉLULA NORMAL CÉLULA ANORMAL CÉLULA MICRONUCLEADA CÉLULA NORMAL ADIÇÃO DE CITOCALASINA B

9 9 Parâmetros: -frequência de células com MN (incidência de células afetadas) -distribuição de MN (extensão do dano ocorrido) 0, 1, 2, 3, 4, 5 MN por célula >5 MN - desprezado Professor Rodrigo Penna

10 10

11 11 Professor Rodrigo Penna

12 12 CLASSIFICAÇÃO DE CÉLULAS DE MAMÍFEROS QUANTO À RADIOSSENSIBILIDADE GRUPO 1: linfócitos eritoblastos espermatogonias GRUPO 2: células granulosas mielócitos células intestinais célualas germinativas da camada epidérmica da pele GRUPO 3: células glandulares gástricas células endoteliais de vasos sanguíneos GRUPO 4: osteoblastos osteoclastos condroblastos espermatócitos e espermátides GRUPO 5: granulócitos osteócitos espermatozóides GRUPO 6: fibroblastos células endoteliais de grandes vasos sanguíneos eritrócitos GRUPO 7: fibrócitos condrócitos fagócitos GRUPO 8: células musculares células nervosas

13 13 RADIOSSENSIBILIDADE DE LINFÓCITOS  normalmente não se dividem  células especializadas e diferenciadas  células altamente radiossensíveis  relação volume nuclear / citoplasma grande  escassos em citoplasma Características

14 14 PROJETO DE PESQUISA  Utilizar os micronúcleos como parâmetro de dosimetria biológica.  Irradiar o sangue de coelhos (ou ratos ou cobaias) e verificar o dano biológico.  Experimentos in vitro. Professor Rodrigo Penna


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