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PublicouGiovana Madeiros Alterado mais de 9 anos atrás
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Doutoranda: Cláudia Turra
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INTRODUÇÃO NP magnéticas → agentes de contraste em RM Óxidos de Fe FeCo, FePt, FePd → fortes propriedades magnéticas dissolução gradual dosmetais Marcação celular Entrega de fármacos Agentes de contraste em RM Hipertermia magnética localizada
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INTRODUÇÃO NP magnéticas do tipo core shell - revestimento de sílica in vitro NP de FePt@Fe 2 O 3 → imagens in vitro FePt@Fe 2 O 3 > FePt@Fe 2 O 4
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INTRODUÇÃO - OBJETIVOS Sintetizar NP de FePt@Fe 2 O 3 do tipo core shell revestidas com PEG Estudos in vitro e in vivo de toxicidade e imagens de RM Adição de AF (in vitro): estabilidade marcação de células de câncer – morte seletiva in vivo: contraste para imagens do tipo T2 de RM tipo T2 toxicidade não observável
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http://www.plataformainterativa2.com/coluna/html/revistacoluna/volume1/imagens_ressonancia.htm
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METODOLOGIA Síntese de NP core shell de FePt@Fe 2 O 3 Síntese de NP de FePt Oleyamina (99%) Ácido oleico (99%) 1,2-hexadecanodiol (90%) 1-octadeceno (99%) Pt(acac) 2 98% Fe(CO) 5 Sigma-Aldrich Deposição térmica partindo do Pt(acac) 2 e Fe(CO) 5 → caroço Crescimento de uma camada de Fe por injeção de Fe(CO) 5 Atmosfera aquecida a 180 ◦ C + fluxo de O 2 por 2h = oxidação → Fe 2 O 3 Dispersão em diferentes solventes orgânicos
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METODOLOGIA Cultura de células Células de carcinoma humano do tipo KB Células HeLa Células hepáticas Células de câncer de mama Crescidas em meios de cultura específicos
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METODOLOGIA Modelos tumorais Ratos Balb/c injetados com 2x10 6 células em 60 μ L de PBS no ombro direito da fêmeas Volume de 60 mm 3 Dieta livre de folato por duas semanas antes da inoculação do tumor
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METODOLOGIA Imagens de RM in vivo Injeção intravenosa com FePt@Fe 2 O 3 -PEG ou FePt@Fe 2 O 3 -PEG-FA (34 mg/kg de Fe) Scanner clínico de 3T com bobina especial para pequenos animais Parâmetros específicos
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METODOLOGIA Hematoxicilina e eosina Ratos não tratados (controle) e injetados com as NP foram sacrificados após 1 e 20 dias da injeção Órgãos (fígado, pulmões, baço, rins, coração e tumores) retirados Fixados em formalina 4% e coloridos com H e E e PSB Examinados em microscópio digital
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METODOLOGIA Bioquímica sérica e análise de sangue Ratos injetados com as NP foram sacrificados após 1, 7 e 20 dias da injeção para coleta de sangue 0,8 mL de sangue por animal foi coletado antes
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RESULTADOS E DISCUSSÕES Síntese via Efeito Kirkendall Difratometria de raios-X: picos característicos de cristal FCC http://www.nanowerk.com/spotlight/spotid=301.php
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RESULTADOS E DISCUSSÕES Estruturas core shell 2,6 nm2,3 nm imagem TEM
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RESULTADOS E DISCUSSÕES 51 nm
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RESULTADOS E DISCUSSÕES Caráter superparamagnético 15
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RESULTADOS E DISCUSSÕES Imagens de RM T2 de soluções de FePt@Fe 2 O 3 -PEG com ≠ [ Fe]
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RESULTADOS E DISCUSSÕES Células KBLiberação de LDH
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RESULTADOS E DISCUSSÕES + - [NP] = 100 μg/mL RM – 3T Temperatura ambiente - 26% - 73% - 25% - 28% 63%
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RESULTADOS E DISCUSSÕES
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pH = 8,0 50 32
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RESULTADOS E DISCUSSÕES Células KB Toxicidade > para NP-PEG-DOX Células HeLa Toxicidade < para NP-PEG-DOX
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RESULTADOS E DISCUSSÕES
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- 37% - 14% - 63% 34 mg/kg de Fe
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RESULTADOS E DISCUSSÕES PEG PEG+FA
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RESULTADOS E DISCUSSÕES
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Bioquímica Albumina/globulina
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RESULTADOS E DISCUSSÕES
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CONCLUSÕES produção e caracterização de NP de FePt@Fe 2 O 3 PEGuiladas NP do tipo core-shell – material para entrega de fármaco e contraste para RM in vitro – entrega de fármaco e morte celular seletiva in vivo – contraste para imagens de RM baixa citotoxicidade estudos futuros - efeitos terapêuticos da DOX + citotoxicidade a longo prazo superfície da NP com engenharia apropriada – potencial agente de contraste para imagens T2 + utilização molecular in vivo + aplicações terapêuticas
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