Estudo do perfil metabólico do carcinoma localizado e metastático da próstata Os Transportadores de Monocarboxilatos (MCTs) como possível alvo terapêutico Tatiana Lourenço 29 de Outubro de 2011

Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || Características das células cancerígenas (“Cancer Hallmarks”) Manutenção das vias de sinalização proliferativas Evasão de supressores de crescimento Alteração do metabolismo celular Evasão à destruição imune Resistência à morte celular Capacidade de imortalidade replicativa Instabilidade genómica e mutação Inflamação promovida pelo tumor Indução da angiogénese Activação da invasão e metastização Adaptado de Hanahan, D. & Weinberg, R.A. 2011

Adaptado de Weinberg et al 2009 Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || Metabolismo celular tumoral - efeito de Warburg Efeito de Warburg Transportadores de Monocarboxilatos (MCTs) Adaptado de Weinberg et al 2009 Consumo de glucose Produção de lactato Produção de energia MCT1 expressão ubíquoa (transporte bi-direccional) MCT2 expresso no fígado e cérebro (elevada afinidade – uptake) MCT4 expresso em tecidos glicolíticos como o músculo (baixa afinidade – efluxo) Lactato pH intracelular Sobre-expressão de MCTs pH extracelular Invasão Metastização Resistência à apoptose

Célula tumoral glicolítica Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || MCTs como alvo terapêutico ? Célula tumoral glicolítica Glicólise ATP Lactato MCT GLUT MCT1/4 CHC Glucose Lactato pH intracelular Apoptose

Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão Análise da expressão de proteínas relacionadas com o metabolismo 105 casos de carcinoma da próstata 76 casos de tecido não neoplásico 40 casos de lesões precursoras (PIN) Linhas celulares (PC3 e LNCaP) MCTs e CD147 LDH V GLUT1 e 12 PDH PDK1 AMARC ACOX3 DBP Glicólise Fosforilação oxidativa β-oxidação lipídica Ensaios in vitro Ensaios de inibição com o agente CHC Viablidade celular (ensaio de sulforrodamina B).

Papel na iniciação do cancro da próstata Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || Caracterização do perfil metabólico de tecidos humanos da próstata Gráfico dos marcadores em casos MCT2 no tumor e lesão PIN. Sobre-expressão das proteínas características de imuno-fenótipo glicolítico e de β-oxidação lipídica, sendo o aumento da expressão das últimas bastante mais significativo. Expressão de algumas proteínas já aumentada na lesão precursora (PIN) ao tumor. Papel na iniciação do cancro da próstata

Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || Caracterização do perfil metabólico das linhas celulares de cancro da próstata MCT1 MCT2 MCT4 CD147 LNCaP PC3 Expressão membranar de MCT1 e CD147 Expressão do MCT2 na linha celular LNCaP Expressão membranar de MCT4 na linha metastática PC3

Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || Caracterização do perfil metabólico em linhas celulares de cancro da próstata GLUT 1 GLUT 12 LDH V AMACR ACOX 3 DBP PDH PDK1 LNCaP PC3 Sobre-expressão de proteínas características de imuno fenótipo glicolítico na linha celular metastática PC3 Maior expressão de proteínas relacionadas com a β-oxidação lipídica no tumor localizado LNCaP. Relação PDH/PDK1 aponta para que a linha celular LNCaP seja mais oxidativa que PC3.

Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão || Avaliação do efeito do agente CHC na viabilidade celular das linhas de carcinoma da próstata Viabilidade (%) Viabilidade (%) PC3 LNCaP Concentração de CHC (mM) Concentração de CHC (mM) LNCaP: 10,81 mM PC3: 7,74 mM 24 h LNCaP: 5,98 mM PC3: 5,05 mM 48 h LNCaP: 6,69 mM PC3:5,02 mM 72 h Maior sensibilidade da linha PC3 ao CHC.

Introdução Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão Diferente perfil de expressão dos MCTs no carcinoma da próstata comparativamente às restantes neoplasias malignas. Evidências para a existência de uma via metabólica alternativa no carcinoma localizado da próstata, com uma importância acrescida da β-oxidação lipídica. Adaptado de Hanahan, D. & Weinberg, R.A. 2011 Tumor primário/localizado Tumor invasivo Tumor metastático Alteração metabólica Mais oxidativo Mais glicolítico MCTs como alvo terapêutico

Muito obrigada pela vossa atenção! Estudo do perfil metabólico do carcinoma localizado e metastático da próstata Os Transportadores de Monocarboxilatos (MCTs) como possível alvo terapêutico Muito obrigada pela vossa atenção! Tatiana Lourenço 29 de Outubro de 2011