Camila Indiani de Oliveira Seminário de Avaliação PRODOCs 1 e 2 Responsável Institucional: Mitermayer G. dos Reis Instituição: CPqGM/FIOCRUZ Departamento: LIP Área/Subárea: Parasitologia/Parasitologia Humana Título do Projeto:Caracterização dos componentes da glândula salivar de Lutzomyia intermedia e de Lutzomyia whitmani e caracterização de suas propriedades imunomoduladoras

Introdução I Prioridade nos programas de controle da OMS Fonte: WHO/TDR e MS/SVS

Introdução II

Introdução III Saliva Hemostasia Lesão tecidual Saliva Hemostasia Coagulação Vasoconstrição Agregação Plaquetária Modificação do microambiente: estabelecimento da Leishmania?

Introdução IV Vacinação com proteína da saliva protege contra a leishmaniose. (Valenzuela et al., 2002). Vacinação com DNA que codifica a mesma proteína protege contra a leishmaniose.

Objetivo do Projeto Estudar a saliva dos flebótomos Lutzomyia whitmani e Lutzomyia intermedia, os principais vetores da Leishmania braziliensis (espécie causadora da leishmaniose tegumentar) na Bahia. Identificar os componentes da saliva destes vetores. Hipótese: proteínas da saliva do vetor são capazes de proteger contra a leishmaniose causada por L. braziliensis.

Resultados alcançados Utilizando um modelo experimental de LTA: Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia. A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose. Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

A resposta imune contra a saliva é mista: indução de mediadores pró-inflamatórios e anti-inflamatórios. CD4 IFN g IL4 IL10 % de células CD8 % de células %

Resultados alcançados Utilizando um modelo experimental de LTA: Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista. A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose? Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

A imunização com saliva não protege contra a leishmaniose. SGS

Resultados alcançados Utilizando um modelo experimental de LTA: Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista. A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose? Ñão. Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

Massive Sequencing of Full-Length Salivary Gland cDNA library Sequence Analysis Salivary gland cDNA database Select candidates and clone into VR2001

Assembler output Sequence Best match to NR protein database Species Average Result Status LI-contig7-asb LIM P5 B07 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001 LI-contig13-asb LIL P3 B02 LI-contig14-asb LIS P9 E07 D7 salivary protein LI-contig17-asb LIS P9 F01 anticoagulant LI-contig18-asb LIS P9 F05 Lu.Longipalpis LI-contig25-asb LIL P2 C06 LI-contig41-asb incomplete LI-contig43-asb LIL P4 A03 antigen 5-related protein LI-contig44-asb LIM P6 F11 LI-contig45-asb LIL P2 H08 LI-contig49-asb LIM P6 G12 LI-contig53-asb LIL P2 E05 LI-contig60-asb LIS P8 B10 gastric mucin (clone PGM-2A) LI-contig62-asb putative yellow related-protein Lu. longipalpis LI-contig73-asb LIS P9 C10 LI-contig85-asb putative apyrase LI-contig100-asb LIS P8 C09 LI-contig103-asb LIS P9 G07

Conclusão I Divulgação: Publicações de Moura TR, Novais, FO, Oliveira, F, Clarencio, J, Noronha, A, Barral, A, Brodskyn C, de Oliveira CI. Toward a novel experimental model of infection to study American cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania braziliensis. Infect. Immun. (2005) 73:5827-34. Saliva de Lu. intermedia: Resposta imune em camundongos e ausência de proteção contra desafio com L. braziliensis. Resposta inflamatória induzida pela saliva: modelo da bolsa de ar.

Conclusão I Divulgação: Publicações Intraspecific polymorphisms of Brazilian isolates of Leishmania amazonensis revealed by DNA sequencing, PCR-based analyses and molecular karyotyping. J.P.C. de Oliveira et al., enviado para publicação. Acta Tropica. Involvement of TCR V12 in the human immune response against Leishmania amazonensis. J. Clarêncio et al., aceito para publicação. Infec. Immun.

Conclusão II Impactos: Formação de recursos humanos Iniciação Científica: Fernanda Novais (concluído) Marcia Weber (em andamento) Renata Andrade (em andamento) Mestrado: Tatiana de Moura (concluído) João Paulo S. C. de Oliveira (concluído) Fernanda Novais (em andamento) Maria José Menezes (em andamento) Sarah Falcão (em andamento) Doutorado: Tatiana de Moura (em andamento)

Agradecimentos Fiocruz – Dra. Aldina Barral et al. FAPESB – Bolsa de Pos Doc. NIAID – Dr. Jesus Valenzuela.