Mestrado em Imunologia Clínica Células T L. Taborda Barata

Morfologia linfocitária

Hematopoiese

Papel das citocinas na hematopoiese

Timo

Timo

Período intra-medular e sanguíneo Ontogenia de células T Período intra-medular e sanguíneo Geração de diversidade no TCR Período intra-tímico Selecção de repertórios

O complexo do TCR

Domínios da estrutura proteica do TCR

Genes codificadores do TCR humano

Recombinação e transcrição dos genes das cadeias ab do TCR

Geração de diversidade no TCR 1. Número de genes codificadores de regiões V (D) J e C das cadeias a e b 2. Recombinação entre genes codificadores de regiões V (D) J e C das cadeias a e b 3. Junção imprecisa entre genes codificadores recombinados 4. Adição de bases novas pela TdT

Período intra-medular e sanguíneo Ontogenia de células T Período intra-medular e sanguíneo Geração de diversidade no TCR Período intra-tímico Geração de diversidade no TCR Selecção de repertórios

Processos de selecção de linfócitos T no timo 1º Passo: Selecção positiva 2º Passo: Selecção negativa

Processos de selecção de linfócitos T no timo Selecção positiva Selecção negativa Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Moléculas do MHC estão envolvidas na selecção positiva de células T ab in vitro Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Selecção positiva de linfócitos T ab no timo

Selecção positiva de linfócitos T ab no timo

Selecção negativa de linfócitos T ab no timo

Selecção intra-tímica de células T Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000) Modelos propostos do papel de CD4 e CD8 na selecção de células T ab no timo Modelo Instructivo Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000) Modelos propostos do papel de CD4 e CD8 na selecção de células T ab no timo Modelo Estocástico Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Processos adicionais de selecção de linfócitos T no timo 1º Passo: Selecção positiva 2º Passo: Selecção negativa Papel de superantigénios

Linfócitos T e superantigénios Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Superantigénios, famílias Vb e patologia Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Superantigénios e famílias Vb Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000) Papel de superantigénios na selecção negativa de linfócitos T no ratinho Tabela obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Processos adicionais de selecção de linfócitos T no timo 1º Passo: Selecção positiva 2º Passo: Selecção negativa Papel de superantigénios Papel de receptores de superfície (CD5, outros)

Processos de selecção de linfócitos T ab no timo 1º Passo: Selecção positiva Inespecífica: depende da afinidade para MHC 2º Passo: Selecção negativa Específica: depende do antigénio

Subtipos de células T na periferia

Maturação de linfócitos Tgd

Lidam com: Ag queratinócitos HSP micobacterianas Células T na periferia CD4+ (++++) TCR ab CD4-CD8- (+) TCR gd (+++) CD8+ (++) Lidam com: Ag externos Ag do próprio MHC clássico MHC não clássico Superantigénios Lidam com: Ag queratinócitos HSP micobacterianas

Subtipos de células T na periferia TCR gd ab CD4+ CD8+ +++ “helper” +++ citólise

Fisiologia de células Tab na periferia

Apresentação de Antigénios Sinapse imunológica Modificado de “Antigen Presentation”, de F. Arosa (2001) e Kuby (2000)

Moléculas co-acessórias em células T, e seus ligandos em células apresentadoras de antigénios

Papel da co-estimulação através de CD28 e CD80/CD86 na activação de células T

Papel da interacção entre CD40 e CD40L na activação de células T

Activação versus anergia em células T Importância do segundo sinal Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Figura obtida de Kuby “Immunology” 4ª Edição (2000)

Expressão de genes em linfócitos T activados Várias citocinas

Alguns padrões de citocinas em células T

Respostas celulares T após correcta apresentação de antigénio Activação celular Proliferação celular Síntese de citocinas Expressão de receptores

Respostas funcionais e efectoras de células T CD4+, expressando TCR ab

Células T “naive” e de “memória” CD45RA+ “naive” Ainda não contactaram com Ag CD45R0+ “memória” Já contactaram com Ag

Activação de linfócitos T “naive” e efectores

Técnicas laboratoriais ligadas à apresentação de antigénio e fisiologia de células T Testes de proliferação celular T utilizando 3H-Timidina Testes de análise de especificidade celular T Análise de diluição limitante (LDA) Técnica de tetrâmeros Avaliação da produção de citocinas em células T Imunoensaios ou bioensaios ELISA ELISPOT Detecção de citocinas intracelulares Avaliação da citotoxicidade de células T: Técnica de libertação de Crómio

Teste de proliferação celular T utilizando 3H-timidina

Testes de análise de especificidade celular T

Análise de diluição limitante (LDA) de células T

Análise com TETRÂMEROS para detectar células T específicas

Avaliação da produção de citocinas em células T

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Ensaio de ELISPOT para quantificar síntese de citocinas por células T

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Testes de avaliação da citotoxicidade de células T