Citoquinas Moléculas de superfície Apoptose Immunologia Citoquinas Moléculas de superfície Apoptose 2001/2002 Prof.Doutor José Cabeda

How immune cells communicate: SOLUBLE MEDIATORS Infection Phagocyte activation CYTOKINES & CHEMOKINES Diverse collection of soluble proteins made by cells that affect the behaviour of other cells. The balance & level of cytokines and chemokines secreted affects the outcome of the response INFLAMMATION Early events involve endothelial cells and result in the accumulation of fluid, plasma proteins & leucocytes. Later events involve the activation and maturation of lymphocytes and other granulocytes.

How immune cells communicate: CELL-CELL CONTACT Peripheral lymphoid tissues trap antigen-containing phagocytic cells and concentrate cells together to promote cell-cell contact. Cell-cell contact occurs at many stages of immune responses. T CTL Target cell Killing T Accessory cell activation Antigen presentation B Y Ab production

Modo de Acção das citoquinas

Propriedades das citoquinas

Detecção de citoquinas: ELISA

Detecção de citoquinas:Bioensaios Activation of M in vitro Test for effect on other cells Cytokine secretion +/- Remove cytokine containing supernatant Which cytokine?

Especificidade dos bioensaios Test for a characteristic effect on other cells e.g. interleukin-1 Induces proliferation in thymocytes Include an antibody that blocks interleukin-1 + + IL-1 absent - IL-1 present

Actividade das citoquinas

Funções de algumas citoquinas (1)

Funções de algumas citoquinas (2)

Funções de algumas citoquinas (3)

Funções de algumas citoquinas (4)

Familias de receptores para citoquinas

Subfamilias de receptores da classe I

Transdução de sinal através de subunidade comum

Formas alternativas de Receptores de interleuquinas

Transdução de sinal mediado por Receptores de Citoquinas

Células Th1 e Th2

Regulação de células Th

As Moleculas de superficie medeiam a interacção celular Resting cells Activated cells Expression and level of expression controls cell-cell adhesion Activation can induce expression. Cell adhesion, migration, antigen specificity, antigen presentation, costimulation, helper function, effector function. Cell surface molecules influenced by activation include cytokine receptors.

Apoptose Processo fisiológico de morte celular programada Processo activo Inibição deste processo é: Activa Altamente regulada

Os processos bioquímicos da apoptose Proteólise Fragmentação genómica Perda de assimetria da membrana celular Fragmentação celular www.nih.gov/sigs/Aboutapo.html

Apoptose mediada por sinais internos à célula A membrana da mitocondria contém bcl-2 ligado a Apaf-1 Dano interno provoca: Dissociação entre o bcl-2 e Apaf-1 Saída de cyt-c para o citoplasma O cyt-c e o Apaf ligam-se a caspase-9 formando o apoptosoma (com ATP) Os apoptosomas agregam, a caspase-9 inicia uma cascata de activação de caspases por proteólise Degradação de proteínas estruturais do citosol Degradação do DNA nuclear www.ultranet.com/~jkimball/BiologyPages/A/Apoptosis.html

Apoptose mediana por sinais externos à célula Fas e o receptor do TNF são proteínas de membrana constitucionais A ligação de FasL e TNF induz: Activação de caspase 8 Inicia a cascata de activação de caspases Degradação de proteínas estruturantes Degradação do DNA nuclear www.ultranet.com/~jkimball/BiologyPages/A/Apoptosis.html

Apoptose em patologias Cancro Inibição da apoptose HPV inactiva o promotor do p53 EBV aumenta a produção de bcl-2 Algumas Leucemias B expressam níveis elevados de bcl-2 Melanoma inibe a expressão de Apaf-1 Alguns tipos de cancros do pulmão e do colon secretam uma proteína que bloqueia o FasL Alguns tipos de tumores expressam níveis elevados de FasL induzindo apoptose nas CTL que com elas interactuam Doenças Auto-imunes Defeitos na indução de apoptose Defeitos na selecção celular Dificuldade em desligar as respostas imunológicas Imunodeficiências Excesso de apoptose Deficiências na selecção positiva