Tecnologia do DNA recombinante Engenharia Genética Tecnologia do DNA recombinante
Bibliotecas genômicas Técnicas de shot-gun – genoma total bactéria Fracionamento aleatório Enzimas de restrição mRNA - eucariotos
Construção de um microrganismo recombinante Encontrar um gene Inserir o gene Vetor de Expressão – origem de replicação, promotor, sítio de ligação, início e término de leitura Transformação / transfecção Identificação dos recombinantes (seleção de clones)
Plantas transgênicas Agrobacterium tumefaciens – plasmídeo Ti Protoplastos – eletroporação + PEG Monocotiledôneas – biobalística (gene gun)
Animais transgênicos Microinjeção – interromper genes naturais ou não funcionamento Animais produtores de fármacos – biofábricas / biorreatores – promotor que se expressa na glândula mamária Inserção por lipossomos, eletroporação, vetores virais, elementos de transposição (P – Drosophila) ou baculovírus.