Cromatografia de Troca Iônica: Separação das proteinas baseadas nas suas cargas líquidas
Cromatografia de Filtração em gel: Separação das proteinas baseadas nos seus tamanhos (pesos moleculares)
Cromatografia de Afinidade: Separação das proteinas baseadas nas suas Afinidades específicas para outras moléculas ou proteínas.
Eletroforese: SDS-PAGE = “sodium dodecyl sulphate polyacrilamide gel electrophoresis”
Gel de SDS-PAGE “corado” com “azul de Coomassie”
Eletroforese isoelétrica
Eletroforese Bidimensional
Resultado de um gel bidimensional de todas as proteínas num tipo de célula
Espectometria de massa MALDI MS: Matrix-Assisted Laser Desorption/ Adsorption Mass Spectroscopy ESI MS: Electroscpray Ionization MS Pico a: (m/z)a = (M + nxp)/n2 Pico a+1: (m/z)a+1= (M+(n+1)xp)/(n+1) Onde M = massa da proteina n = número de cargas no Pico “a” p = massa de de um proton Duas equações e duas variáveis não conhecidas: Logo, pode determinar o valor de M com alta precisão
Espectometria de massa
Espectometria de massa
Espectometria de massa