Imunofluorescência.

Apresentação em tema: "Imunofluorescência."— Transcrição da apresentação:

1 Imunofluorescência

2 Fluorocromo

3 Microscópio de Imunofluorescência
Filtro barreira 519 nm 495 nm Filtros de excitação Lâmpada de mercúrio ou halogênio (alta intensidade)

4 Microscópio de Imunofluorescência

5 Imunofluorescência Imunofluorescência Direta (IFD) Imunofluorescência Indireta (IFI)

6 Imunofluorescência Direta (IFD)
Lavagem

7 IFD

8 Imunofluorescência Indireta (IFI)
Lavagem Lavagem

9 Imunofluorescência Indireta (IFI)

10 Nuclear Homogêneo Anti-DNA e anti-Histona
Marcador para Lupus Eritrematoso Sistêmico

11 Nuclear Pontilhado Grosso
Anti-Sm e anti-RNP Marcadores para Lupus Eritrematoso Sistêmico

12 Nucleolar homogêneo Anticorpo anti-To/Th.
75% - Esclerodermia Sistêmica

13 Prognóstico Favorável
Centromérico 70% Esclerodermia Variante CREST Prognóstico Favorável Anticorpo anticentrômero (proteínas CENP-A, CENP-B e CENP-C).

14 Centromérico

15 Nuclear Pontilhado Fino Denso
Anti-P75: correlação clínica ainda não estabelecida.

16 Exemplo de laudo de FAN

17 Associação FAN x clínica

18 Padrões de FAN mais comuns

19 Pesquisa de anticorpo anti-DNA
Teste reagente: IFI em Crithidia luciliae

20 Pesquisa de ANCA Anti-proteinase 3 Anti-MPO

21 Diagnóstico IFD x IFI IFI IFD Mais Específico Mais Sensível Antígeno
Menor Intensidade Conjugado IFI Mais Sensível Anticorpo e Antígeno Maior Intensidade Conjugado Determina classes e sub classes de anticorpos com conjugados específicos

22 Vantagens Teste de referência em muitas doenças
Sensibilidade = 96% a 100% Especificidade = 99,8% a 100% Reprodutível Padronização e Execução simples Utilização de cepas de referência Disponíveis comercialmente

23 Desvantagens Autofluorescência Fotodestruição Necessidade de microscópio de fluorescência Subjetividade da leitura

24 Diagnóstico Laboratorial
Chlamydia trachomatis Citomegalovírus Vírus do Herpes Treponema pallidum Trypanosoma cruzi Toxoplasma gondii Vírus da Rubéola Plasmodium falciparum Auto anticorpos contra diferentes estruturas celulares

25 Pesquisa

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27 Insulina – Verde Nestina – Vermelho Núcleo – Azul Co-localização - Amarelo

28 Novo padrão citoplasmático de IFI, não observado em nenhuma amostra controle e em 15,4% (16/104) dos pacientes portadores de HCV. (P=0,002)

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