Avanços no Diagnóstico da Tuberculose

Apresentação em tema: "Avanços no Diagnóstico da Tuberculose"— Transcrição da apresentação:

1 Avanços no Diagnóstico da Tuberculose
Encontro Nacional de Infecções Respiratórias e Tuberculose Fernanda C Q Mello Instituto de Doenças do Tórax – Faculdade de Medicina - UFRJ

2 DIAGNÓSTICO Avanços Reduzir tempo de execução
Atingir distintas populações: adultos, crianças, suspeitos de resistência Aumentar acurácia: sensibilidade e especificidade Reduzir custos: diretos e indiretos Permitir o acesso aos resultados para tomada de decisão

3 DIAGNÓSTICO Tuberculose Pulmonar Tosse Quem? Febre Sudorese noturna
Emagrecimento Com ou sem fatores de risco associados: HIV, silicose, transplante, insuf. renal crônica, infecção recente, seqüela radiológica sem tto, perda de peso (>15%), diabetes mellitus, uso de inibidores de TNF-alfa

4 DIAGNÓSTICO

5 Ba Baciloscopia positiva
DIAGNÓSTICO Cavitação com 2 cm 109 bacilos/ml Ba Baciloscopia positiva 104 bacilos/ml Cultura positiva 10 a 102 bacilos/ml

6 LED microscopia fluorescente
DIAGNÓSTICO BACILOSCOPIA LED microscopia fluorescente Tempo de execução 4x menor X rendimento maior Lancet Infect Dis 2006; 6: BAAR

7 DIAGNÓSTICO LED Rockembach et al, 2011 submetido
Current scenarioa Scenario 1 Scenario 2 Scenario 3 ZN LED Total cost 3,476.22 3,683.58 3,592.96 3,770.16 3,427.73 3,647.64 3,516.89 3,707.93 Correct diagnosis rate 0.95 0.97 0.986 0.99 0.94 0.96 0.87 0.90 Cost per correct diagnosis 25.01 26.12 24.93 26.06 25.04 26.15 27.80 28.41 Current scenario: TB Prevalence of 38.4%; ZN sensitivity of 87.5%; LED sensitivity of 91.1%. Scenario 1: TB Prevalence of 10%. Scenario 2: TB Prevalence of 50%. Scenario 3: ZN sensitivity of 65.1%; LED sensitivity of 72.3%.

8 DIAGNÓSTICO CULTURA 3-8 sem LJ x 1-3 sem MGIT Löwestein – Jensen (LJ)
Bactec 960 (MGIT) (validado cultura e TS – SIRE) Bactec 9000 * (validado cultura - sangue) 3-8 sem LJ x 1-3 sem MGIT Sensibilidade 70% a 96% Especificidade 98% Int J Tuberc Lung Dis 2008; 12: Drobniewski et al. Lancet Infect Dis 2003; 3:141-47

9 DIAGNÓSTICO TESTE DE IDENTIFICAÇÃO Sondas Genéticas
Capilia TB Rapid Diagnostic Test A partir de cultura em meio sólido ou líquido, detecta antígeno específico de M tb (MPB 64) Quem?

10 MGIT kit SIRE – rapidez! (semanas)
DIAGNÓSTICO TESTES DE SENSIBILIDADE LJ MGIT kit SIRE – rapidez! (semanas) Sens Esp Estreptomicina 100 % (88,9%) Isoniazida % (97,1%) Rifampicina % (100%) Etambutol ,5 % (81,8%) Quem? Tortoli E et al J Clinical Microbiol 2002; 40:

11 DIAGNÓSTICO TESTES SOROLÓGICOS Sensibilidade e especificidade ainda inadequadas para uso rotineiro Int J Tuberc Lung Dis 2008; 12:

12 DIAGNÓSTICO Métodos Diagnósticos de Biologia Molecular Detecção
Identificação das espécies Detecção de resistência

13 PCR Amplificação de DNA “in vitro” – sequencia alvo
extensão do anelamento a 720 C desnaturação do DNA a 940 C anelamento a 680 C

14 DIAGNÓSTICO ANN (PCR) Sensibilidade Especificidade
escarro BAAR % % escarro BAAR % % E-MTD – PCR Sensibilidade BAAR - 83,3% Especificidade 99,1% J Clin Microbiol. 37: , 1999.

15 DIAGNÓSTICO INTERPRETAÇÃO CDC 2000 BAAR AAN CONCLUSÃO + TB - MNT
Provável TB TB? AAN: amplificação de ácidos nucléicos; MNT: micobactéria não tuberculosa

16 Gene Xpert (Cepheid, Sunnyvale, CA)
DIAGNÓSTICO Gene Xpert (Cepheid, Sunnyvale, CA) Detecção e Resistência “Real-time” PCR para detecção de M. tuberculosis + avaliação da resistência à Rifampicina Lise bacteriana por ultrassom Cartucho único com compartimentos para lavagem, purificação, concentração de DNA e reação de PCR para detecção Tempo total para resultados: 1:45h

17 DIAGNÓSTICO Gene Xpert MTB/Rif

18 DIAGNÓSTICO Gene Xpert MTB/Rif Sensitivity In S+C+ In S-C+ Specificity
in Non-TB 99.5%* [98.4% %] 90.0%* [84.6% %] 97.9%* [96.4% %] 99.4%** [98.6% %] 85.0%** [79.7% %] 98.6%** [97.5% %] 98.2%*** [96.8% %] 72.5%*** [65.4% %] 99.2%*** [98.1% %] * three samples, ** two samples, *** one sample Boehme C, et al. 2010, N Engl J Med. 363(11): , 2010.

19 DIAGNÓSTICO Resistência Rifampicina Sensibilidade 95%
Especificidade 98%

20 DIAGNÓSTICO Resistência
LiPA - Line Probe Assay - hidridação reversa / amplificação por PCR de um segmento do gen rpoB Resistência Reprodutibilidade – Laboratório (Bélgica) N= 411 LiPA X Bactec Sensíveis (n=145) 100% Resist. RIF (n= 266) 98,5% Traore H et al. Int J Tuberc Lung Dise 2000; 4 (5): 481

21 DIAGNÓSTICO Resistência “Geno Type MTBDR plus test”
Isolados de cultura / escarro positivo para BAAR Detecta resistência à RH em poucas horas R – identificação de mutações no gene rpoB H – identificação de mutações nos genes katG e inhA Validado em 2007

22 DIAGNÓSTICO

23 GenoType® Mycobacterium CM/AS
DIAGNÓSTICO GenoType® Mycobacterium CM/AS Espécie

24 DIAGNÓSTICO Tuberculose Extrapulmonar
“ Gene Xpert MTB/Rif” “Com preparo prévio dos espécimes” Sensibilidade de 85,7 % ( IC 95% : 57%-98%) Especificidade de 97,3% (IC 95% : 90%-99%) Int J Tuberc Lung Dis 2011; 15: Não validado para uso em espécimes extrapulmonares.

25 TB Extrapulmonar Gene Xpert
DIAGNÓSTICO TB Extrapulmonar Gene Xpert J Cinical Microbiol 2011, 49(7):

26 DIAGNÓSTICO TB Extrapulmonar Gene Xpert
J Cinical Microbiol 2011, 49(7):

27 DIAGNÓSTICO OMS 2011 – Xpert MTB RIF
Teste inicial em suspeito de TB resistente e para TB/HIV co-infectados (fortemente recomendado) Teste a ser solicitado após baciloscopia negativa em suspeito de TB sem as condições acima (recomendação condicional) Evidências sugerem extensão das indicações para crianças Utilização em escarro espontâneo Baciloscopia e cultura para acompanhamento

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29 Obrigada pela atenção !