Organização Gênica de Eucariotos

Apresentação em tema: "Organização Gênica de Eucariotos"— Transcrição da apresentação:

1 Organização Gênica de Eucariotos
Universidade Federal de Pelotas Centro de Biotecnologia Graduação em Biotecnologia Biologia Molecular Organização Gênica de Eucariotos

2 Classificação dos seres vivos de acordo com Woese (1977)

3 Protistas (protozoários e leveduras)
Domínio Eukarya Reinos Protistas (protozoários e leveduras) Fungi (fungos) Plantae (vegetais) Animalia (animais)

4 GENE Sequência nucleotídica necessária e suficiente para a síntese de um polipeptídeo ou de uma molécula de RNA estável

5 Estrutura e expressão de um gene eucariótico

6 Tamanho médio dos genes
Maiores em Eucariotos E. coli – 0,9 kb S. cerevisiae – 1.4 kb D. melanogaster – 11,3 kb H. sapiens – 19,2 kb

7 Há uma tendência geral de aumento do número de genes interrompidos, do número de íntrons por gene e do tamanho dos íntrons individuais à medida que se avança na escala evolutiva, o que determina que o tamanho médio dos genes (incluindo íntrons) seja maior em organismos mais complexos

8 Íntrons Um gene contém em média 3,7 íntrons por kb de região codificadora No homem o número médio é de 5 íntrons por gene 94% dos genes contém íntrons O tamanho médio dos íntrons é de 125 pb O tamanho médio dos éxons é de 90 a 120 pb (30 a 40 aa)

9 Então, porque a evolução nos presenteou com estas seqüências?
A presença de íntrons nos genes eucarióticos, aparentemente, representa um enorme desperdício celular Então, porque a evolução nos presenteou com estas seqüências? Mecanismo de proteção contra mutações Diversidade: genomas e proteomas (splicing alternativo) Regulação gênica...

10 Genomas Eucarióticos - Aspectos Gerais
Genoma nuclear (gDNA): material genético contido no núcleo Genoma de organelas (mtDNA e ctDNA): mitocôndrias, cloroplastos DNA dividido em 2 ou mais cromossomos Geralmente diplóides: 2 conjuntos de cromossomos Podem ser haplóides (leveduras e alguns fungos com 1 conjunto) ou poliplóides (3 ou mais cópias de cada cromossomo) Dois ou mais cromossomos lineares

11 Célula animal Célula vegetal

12 Número de cromossomos em alguns organismos

13 conjunto cromossômico
Normal Down Cariótipo normal CARIÓTIPO conjunto cromossômico Síndrome de Down Turner Miado do gato Síndrome de Turner Síndrome de Cri du chat

14 Conteúdo de DNA por genoma haplóide = Valor C
Quantidade de DNA presente no genoma em pb! Procariotos: 5 x 10 5 e 10 7pb - Eucariotos: 107 a 1011 Quanto mais complexo o organismo, maior o valor C

15 Paradoxo do Valor C É a impossibilidade de correlacionar o tamanho do genoma (valor C) com a complexidade das características morfológicas, fisiológicas e comportamentais do organismo. Resultado da presença de seqüências de DNA repetida

16 Acredita-se que o número total de genes seja proprocional ao aumento da complexidade dos organismos
reduzido

17 Número de proteínas ≠ número de genes
Número de proteínas maior do que o número de genes Geração de múltiplas cópias de RNA a partir de um único gene Produz 18 isoformas da proteína, a partir do uso de 2 códons de início de tradução alternativos e por splicing alternativo de 12 dos seus 23 éxons Gene da proteína 4.1 de eritrócitos humanos

18 Cinética de renaturação de um genoma eucariótico: estimativa da fração de um genoma que corresponde a sequências únicas ou repetidas DNA extraído é fragmentado, desnaturado e renaturado. A proporção de moléculas renaturadas em relação às desnaturadas é analisada em função do tempo Quanto maior for a proporção de sequências únicas no genoma, maior será o tempo necessário para renaturação. Sequências repetidas tem maior velocidade no processo de renaturação

19 Classes de sequências Sequências não-repetitivas (muito complexas)
Sequências moderadamente repetitivas Sequências altamente repetitivas (pouco complexas)

20 Moderadamente repetitivos:
Famílias gênicas 25 a 50% dos genes são de cópia única (não repetitivo) Família gênica: possuem sequências com grau variado de similaridade entre si – 30% a 40 % de identidade. Tem funções relacionadas ou idênticas, mas podem ser expressos em diferentes estágios. Agrupamento de genes ou espalhados pelo genoma Moderadamente repetitivos: Genes que codificam tRNAs: > 1300 cópias no homem Genes que codificam rRNA: de 100 a 200 cópias por genoma Genes que codificam histonas: 300 a cópias (ouriço-do-mar)

21 Seqüência de DNA repetitivo
DNA de seqüência simples Seqüência curta (5 a 10 pb) repetida milhares de vezes em tandem. Representa 10 a 15% do DNA de mamíferos Fração de reassociação intermediária: sequências moderadamente repetitivas (25 a 40% do DNA). Maior parte derivada de sequências de famílias de elementos transponíveis Transposons Retrotrasposons: movimento é mediado por um RNA e envolve uma etapa de transcrição reversa de seu RNA.

22 Genomas de Organelas ctDNA
Genomas Extranucleares: codificam funções relacionadas ao metabolismo das próprias organelas Mitocôndrias – mtDNA Plastídios: família de organelas vegetais Cloroplastos Cromoplastos Amiloplastos Elaioplastos ctDNA

23 Estrutura de um Gene de Procarioto
Promotor Região Codificadora Terminador Estrutura de um Gene de Eucarioto Promotor Região Codificadora Sítio de PoliA hnRNA AAAAAAAAAA mRNA Exon Intron DNA RNA

24 O GENOMA HUMANO

25 Fim do sequenciamento dos outros organismos
A idéia do sequenciamento foi primeiramente proposta em encontros cientificos Fim do sequenciamento dos outros organismos 1995 1999 2004 1990 1998 2001 O Projeto Genoma Humano foi lançado com a criação de centros de genoma nos seguintes países: EUA, Reino Unido, Japão, França, Alemanha e China

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27 determinar a sequencia completa de nucleotídeos do genoma humano

28 Mapeamento do genoma Mapa Citogenético (FISH): características dos cromossomos visíveis em microscópios Mapa Genético (genealogia): posicionam genes baseados na transmissão de locus polimorficos ao longo de genealogias Mapa Físico (Clonagem e caracterização de fragmentos): mostram as distâncias reais entre marcadores e genes

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30 Consórcio Internacional do Sequenciamento do Genoma Humano

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32 Projeção de duração de 15 anos Duração total de 13 anos (1990–2003)
Projeto patrocinado pelo Instituto Nacional de Saúde dirigido por Francis Collins e pelo Departamento de Energia - EUA Projeção de duração de 15 anos Duração total de 13 anos (1990–2003) Planejamento de custo de $3 bilhões Maior genoma sequenciado até agora (2001) 1º genoma de veterbrados sequenciado

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34 Total de pares de bases de 3 bilhões para 2,851,330,913
Número de genes entre a A versão atual do catálogo de genes consta com genes conhecidos e genes preditos 3.7 milhões de SNPs mapeados

35 The Sequence of the Human Genome

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37 Anotação das seqüências
Bioinformática

38 Identificação de alvos para terapias
DESAFIOS Identificação de polimorfismos na população humana e associação com doenças Identificação de alvos para terapias Identificação de elementos funcionais do genoma: genes, proteínas, regiões regulatórias e elementos estruturais Identificação de como os genes e as proteínas funcionam em conjunto