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Microscopia Eletrônica Prof. José Lino Neto – UFV.

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Apresentação em tema: "Microscopia Eletrônica Prof. José Lino Neto – UFV."— Transcrição da apresentação:

1 Microscopia Eletrônica Prof. José Lino Neto – UFV

2 Microscópio de Luz - Cortes -

3 Microscópio de Luz - superfície -

4 Microscópio de Luz - ML Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET Microscópio Eletrônico de Varredura - MEV

5

6 ML: 1.000x 0,2 µm MET: x 0,0002 µm MEV: 10 a x 0,02 µm

7 METMEV

8 Epitélio da mucosa intestinal

9

10 Filamento

11

12 Canhão de elétrons

13

14 Lentes magnéticas

15

16 Câmara

17 Câmara e porta-amostra

18 Porta amostra - stubs

19 Formação da imagem

20 Análise da imagem

21 Preparo do material Fixação Desidratação Secagem ao ponto crítico Montagem nos suportes - Stubs Sputter coat MEV

22 Protocolo 1- Fixar em solução de glutaraldeído e/ou paraformaldeído em tampão cacodilato de sódio (ou fosfato) a 0,1M (animal) ou 0,05M (vegetal) em pH 7,2. Tempo: 2 a 24 hs. 2- Lavar por 1-2 hs em vários banhos do tampão; 3- Pós-fixar em tetróxido de ósmio por 1 h ao abrigo da luz; 4- Lavar em 2 banhos de 15 min em tampão caco, ou água destilada; 5- Desidratar as peças, mantendo-as submergidas, em serie crescente de etanol ou acetona (50% 70% 80% 95% 100%). Cada etapa deve ser feita em dois banhos de 15 min cada; 6- Ponto crítico; 7- Montar as peças secas nos stubs; 8- Sputter coat para proceder a cobertura com ouro.

23 Ponto-crítico

24 Sputter coat

25 slide show

26

27

28 Organelas celulares

29 slide show Dinoflagelados

30 slide show Cultura de células

31 slide show Superfície foliar de Corymbia citriodora Espinha de ouriço

32 slide show Espermatozóides de hamster

33 slide show Ammoplanops moenkopi (Sphecidae Pemphredoninae)

34 slide show Dryudella montana (Sphecidae: Astatinae) Eucerceris superba (Sphecidae Philanthinae)

35 slide show Epitélio traqueal

36 slide show Pata de lagarta

37 slide show Antena de Lepidoptera

38 slide show Esporo de um fungo Detalhe da para de um inseto

39 slide show

40 Fig. 1 Objetiva = 40x Optovar = 3,5x Ampliação = 15x Fig. 2 Objetiva = 20x Optovar = 3,5x Ampliação = 15x Fig. 2 Objetiva = 100x Optovar = 3,5x Ampliação = 15x 1 2 3


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