Limpeza, montagem e esterilização. Lab. De Microbiologia

Apresentação em tema: "Limpeza, montagem e esterilização. Lab. De Microbiologia"— Transcrição da apresentação:

1 Limpeza, montagem e esterilização. Lab. De Microbiologia
Prof. IVAnéa

2 MATERIAL DE LAB DE MICROBIOLOGIA

3 Alguns aparelhos

4 Outros

5 Executar técnicas de preparo e montagem para esterilização.
Objetivos Caracterizar a estrutura e o funcionamento de um laboratório de microbiologia; Executar técnicas de preparo e montagem para esterilização.

6 Introdução Uma laboratório de microbiologia destina-se principalmente em isolar, identificar, caracterizar, quantificar e conservar os microrganismos. No estudo de microbiologia são indispensáveis: Execução de preparações microscópicas Esterilização de vidrarias Preparo de meio de cultura e de materiais diversos Técnicas de cultivo Isolamento e outros ensaios microbiológicos Para o bom desempenho dessas tarefas é necessário dependências adequadas como: Sala de microscopia Câmara asséptica ou fluxo laminar Sala de lavagem, montagem e esterilização... Biotério

7 Métodos LAVAGEM DE VIDRARIAS E SECAGEM
As condições de limpeza e higiene devem sempre prevalecer e são de fundamental importância em um laboratório de microbiologia. Uma das soluções mais usadas para a lavagem de vidraria é a solução sulfocrômica. Material novo: Água com sabão, água corrente, água destilada. Material em uso Contaminado autoclavação em baldes, água e sabão, enxaguar em água corrente, solução sulfocrômica (se necessário), água corrente, água destilada. Não contaminados semelhante ao anterior sem autoclavação Ácido sulfúrico concentrado comercial g Bicromato de sódio comercial g Água q.s.p g Dissolver o Bicromato em água. Em seguida, adicionar lentamente o ácido sulfúrico, com o recipiente de Bicromato, imersa em água com gelo A vidraria lavada deverá ser posta em estufa a cerca de 70°C e posteriormente, se for o caso, será preparada, montada e esterilizada.

8 PREPARO E MONTAGEM DO MATERIAL
Montagem consiste na preparação do material para a esterilização Todo o material deve ser protegido após a esterilização para que não ocorra risco de contaminação. Pipetas – lavadas e secas, deve-se colocar um pequeno tufo de algodão na extremidade de aspiração. A montagem das pipetas consiste me sua colocação em recipientes metálico (cânulas), com a parte de aspirar para cima ou enrolá-las em papel, uma a uma. Placas de Petri – são esterilizadas em um recipiente metálico ou envolvidas em papel em grupos de 2, 3 ou até 10 unidades. Tubos de ensaio – com ou sem meio de cultura são geralmente tampados com algodão hidrófobo, colocados em recipientes (lata, Becker...) fechados com papel ou alumínio.

9 ESTERILIZAÇÃO Calor úmido
Água fervente: a água em ebulição mata microrganismos (bactérias na forma vegetativa) pela coagulação das proteínas. Mas, não destrói esporos. Esse método é raramente utilizado em trabalhos de laboratório. Vapor de água a 100°C (conhecido como “vapor fluente”): Uma maneira de se conseguir vapor fluente de modo prático é através da autoclave com a válvula aberta, cerca de 30 a 60 minutos. Esse método é utilizado para meio ou substâncias termolábeis. Vapor de água acima de 100°C: o método mais utilizado é da autoclavagem. Cuidados necessários: A calibragem do manômetro deve ser observada (121°C ou 1 atm). O nível da água dentro da autoclave tem que estar cobrindo a resistência elétrica. O nível da água não deve entrar dentro do cesto onde vai o material a ser esterilizado. A tampa deve ser bem fechada A válvula de segurança tem que estar aberta, somente após a observação do,vapor fluente (por 5 minutos) ela deve ser fechada para atingir a temperatura e pressão desejadas e contar de 20 a 30 minutos para desligar a autoclave.. Esperara a o manômetro voltar ao ponto zero, abre-se a válvula de vapor; em seguida a tampada da autoclave é levantada.

10 ESTERILIZAÇÃO Calor seco
Calor ao rubro: é usado para alças e agulhas inoculadoras, as quais são esterilizadas mantendo-as expostas à chama do bico de Bunsen. Estufa ou forno elétrico: esse processo é usado principalmente para esterilizar vidraria não volumétrica.

11 ESTERILIZAÇÃO filtração
É amplamente utilizada para esterilização de soluções termolábeis. Os filtros mais satisfatórios são os filtros de membrana, feitos de acetato de celulose. O filtro é comumente adaptado a um frasco de sucção ou Kitasato. A solução é, então despejada no filtro e aspirada por sucção. A solução filtrada é transferida para um frasco ou tubo de ensaio previamente esterilizado, munido de tampão de algodão, ou outro tipo de protetor