Retículo Endoplasmático

Apresentação em tema: "Retículo Endoplasmático"— Transcrição da apresentação:

1 Retículo Endoplasmático
Docente: Profa. Dra. Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira Colaboração: Ester Tartarotti / Priscila Pasqüetto Mendonça / Lilian Franco Belussi

2 Retículo endoplasmático
I– Introdução II- Métodos de estudos III– Constituição química das membranas do Retículo Endoplasmático IV- Funções: Retículo Endoplasmático Liso/Rugoso V- Biogênese do Retículo Endoplasmático (Origem)

3 I- Introdução Caracterização geral: Sistema de endomembranas

4 - Retículo Endoplasmático Rugoso (Granular)
- Retículo Endoplasmático Liso (Agranular) RE

5 Ocorrência: a) RE inexistente/pouco diferenciado → células não relacionadas à atividade protéica b) RE pequeno → ovos; células embrionárias ou indiferenciadas c) RE desenvolvido → células com ↑ síntese protéica Ex.: célula pancreática → produz ↑ enzimas

6 d) RE liso → ocorre no ápice das células do epitélio intestinal → absorção de gotículas de gorduras
e) REL extenso → células secretoras de esteróides Ex.: células secretoras de hormônios do córtex da glândula supra-renal

7 Polissomos: Polissomos/Polirribossomos → Ribossomos + RNAm
a) Unidos à membrana (proteínas → RE) Ex.: células animais → secretam proteínas b) Livres no citoplasma (proteínas citoplasmáticas) Ex.: células com crescimento rápido - cancerosas - embrião - reticulócitos

8 c) Unidos à membrana e livres no citoplasma
Ex.: hepatócitos

9 I- Métodos de estudos a) Microscopia de luz → Ergastoplasma → Basofilia citoplasmática b) Microscopia eletrônica Ex.: célula pancreática

10 c) Técnicas de detecção enzimática
Exemplos: Detecção de enzimas de ação peroxidásica (células da glândula tireóide e glândula salivar) Enzima glicose-6-fosfatase (enterócito) d) Técnicas imunocitoquímica/imunofluorescência Exemplo: Distribuição da proteína de RE de células de mamífero em cultura

11 e) Técnicas bioquímicas

12 III– Constituição química das membranas do Retículo Endoplasmático
Lipídeos Proteínas estruturais Enzimas Citocromos Outras enzimas oxidativas Glicose-6-fosfatase Citocromo b5 e redutase Citocromo P450 NADPH-cit P450 redutasse Nucleosídeo difosfatase RE Liso→ > Fosfolipídeos e ↑ Glicose-6-fosfatase

13 IV– Funções Retículo Endoplasmático Rugoso e Liso 1. Suporte mecânico
- Associação com o sistema de microtúbulos e microfilamentos  suporte para as áreas coloidais do citoplasma 2. Trocas Difusão e transporte ativo através das membranas do sistema vacuolar 3. Gradientes iônicos e potenciais elétricos Retículo sarcoplasmático (células musculares) 4. Fluidez da membrana Transporte de partículas, moléculas e íons para dentro ou fora da célula RE + envoltório nuclear  transporte de RNA e nucleoproteínas do núcleo para o citoplasma

14 IV– Funções Retículo Endoplasmático Rugoso e Liso
6. Armazenamento e estocagem (segregação) O RE armazena e concentra substâncias provenientes do meio intra e extracelular Ex: a segregação de enzimas pancreáticas (grânulos de zimogênio): protege a célula de lesões e danos Grânulos de zimogênio

15 Retículo Endoplasmático Rugoso e Liso 7. Transporte intracelular
- A proteína sintetizada nas cisternas do RER é conduzida para o complexo de Golgi  processo realizado por vesículas de transferência  fusão de membranas

16 Marcação proteínas recém sintetizadas → aa radioativos
Retículo Endoplasmático Rugoso 8. Síntese de proteínas - Entrada de proteínas no RE Ex.: célula acinosa pancreática → secreta enzimas digestivas Marcação proteínas recém sintetizadas → aa radioativos

17 Hipótese do sinal (Blobel & Sabatini, 1971)
Síntese de proteínas: Hipótese do sinal (Blobel & Sabatini, 1971) a) RNAm para proteínas secretoras contém uma seqüência de códons sinais; b) A tradução dos códons sinais para iniciar a síntese protéica acontece nos polissomos livres do citoplasma; c) Os polissomos livres são trazidos para o RER para iniciar o processo de descarga unidirecional;

18 Hipótese do sinal (Blobel & Sabatini, 1971)
Síntese de proteínas: Hipótese do sinal (Blobel & Sabatini, 1971) d) A maioria dos aminoácidos encontrados em “seqüências de sinal”  cadeias laterais hidrófobas (leucina e valina)  conformações que favorecem a penetração na dupla camada lipídica do RER; Partícula de Reconhecimento de Sinal: complexo alongado contendo 6 subunidades de proteína e uma molécula de RNA (SRP RNA)

19 e) Quando a cadeia de polipeptídeos atravessa a membrana do RER, ocorrem modificações importantes: “peptídeo de sinal” é removido antes do término da síntese protéica

20 Modificações da Cadeia de Polipeptídios no RER:
1- Remoção do “peptídeo sinal” Ex.: a clivagem do “peptídeo de sinal’ converte pré-tripsinogênio em tripsinogênio (proteína secretora do pâncreas exócrino) 2- Etapas de processamento na maturação de proteínas a) Glicosilação  adição de glicídios nas proteínas formadas  glicoproteínas Inicia-se no RER e termina no Complexo de Golgi

21 b) Ligações dissulfídicas  essas ligações convertem o polipeptídeo linear em forma globular  impedindo sua saída do RER. c) Formação de complexo com lipídios  lipoproteínas

22 d) Clivagens sucessivas de polipeptídeos  proteína funcional
- Ex: o ribossomo libera a molécula pré-pró-insulina  pré (remoção da seqüência de sinal) e pró (durante a passagem pela célula, mais uma seqüência é excisada

23 Retículo Endoplasmático Liso
9. Desintoxicação de medicamentos - Drogas insolúveis → tendem a se acumularem no organismo podendo chegar a níveis tóxicos Detoxificação: reações de hidroxilação que transformam drogas insolúveis em substâncias hidrossolúveis Ocorre no REL : fígado, rins, pele e pulmões - Hidrocarbonetos aromáticos (combustão), DDT, plastificantes, conservantes dos alimentos e vários medicamentos. Ex: fenobarbital em ratos  aumento acentuado nas quantidades do REL do hepatócito e das enzimas que metabolizam essa droga.

24 Retículo Endoplasmático Liso
10. Síntese de lipídios a) Fosfolipídeos sintetizados do lado citosólico da membrana do RE

25 Retículo Endoplasmático Liso
10. Síntese de lipídios b) Síntese de hormônios esteróides REL → abundante em células especializadas que sintetizam esteróides Ex.: células do testículo e ovário - Hormônios esteróides são sintetizados a partir do colesterol no RE

26 Retículo Endoplasmático Liso 11. Glicogênese e glicogenólise
Microscopia eletrônica Hepatócito Microscopia de luz – PAS+ (REL) - Degradação de glicogênio acumulado em grânulos no citoplasma Glicose-6-Fosfatase Glicose-6-Fosfato Glicose + Pi H2O

27 Retículo Sarcoplasmático
Retículo Endoplasmático Liso 12. Armazenamento de cálcio - Reserva de cálcio intracelular nas células musculares - Envolvimento na contração muscular - REL = Retículo sarcoplasmático Retículo Sarcoplasmático

28 Biogênese do Retículo Endoplasmático
- A origem do RE não é definitivamente conhecida. Teoria: - RE  desenvolve-se pelas expansões do envoltório nuclear - Divisão celular: Metáfase: fragmentos do RE + fragmentos do EN Telófase: reorganização RE + EN Células-filhas: existência de RE (molde pré-existente) A origem do REL está baseada em duas hipóteses: REL origina-se no RER pela perda de seus ribossomos REL origina-se de proteínas que, sintetizadas pelo RER, migram através da membrana deste até as extremidades e sofrem a adição de lipídios  crescendo e formando novas membranas.

29 “O estudo do Retículo Endoplasmático Rugoso e Liso, nos mostra, de uma forma muito especial, que a Biologia Celular e Molecular tem muitas atividades interdisciplinares e, que, todos esses conhecimentos poderiam não ser completos sem o espírito da boa vontade, amizade e cooperação que deve ser dominado nas relações pessoais entre os pesquisadores que se dedicaram a essa macro-micro área. Um novo mundo foi aberto para ser explorado por esses pesquisadores. O excitamento da descoberta e a semelhança da proposta os têm levado para uma caminhada em conjunto. A amizade e respeito mútuo, gerados nos dias excitantes da descoberta permaneceram e fortificaram o Campo da Biologia Celular.”

30 Obrigada!