II Grupo Ivane Lacerda Magalhães Irene António Milange Justino Afonso Sizela Manuel Henriques Ossene Momade Fernando Mussa Regras de Higiene e Segurança no Laboratório de Química “Manuseamento de amostras, derrames, corrente elétrica e segurança no Laboratório”. Docente: Dr. Pedro Geraldo

Estrutura do Trabalho 1. Manuseamento de amostras num laboratório; 1.1 Cuidados gerais a ter 1.2. Manuseio de Produtos Químicos Regras de segurança para manuseiamento de produtos químicos; Regras no manuseio de gases; Cuidados a ter no manuseamento de amostras biológicas Animais de laboratório Amostras humanas; 1.4. Derrames no laboratório;

Cont… Primeiras providências: Sólidos inflamáveis - tóxicos - corrosivos Gases inflamáveis-corrosivos - oxidantes Líquidos inflamáveis - miscíveis ou não em água-tóxicos - corrosivos 2. Corrente eléctrica e segurança no Laboratório Cuidados gerais 2.2. Montagem dos circuitos e preparação para energização 2.3. Cuidados na operação de circuitos energizados 3. Manuseamento de Microrganismos

1. Manuseamento de amostras num laboratório No manuseamento de amostras biológicas deve-se por norma utilizar recipientes de vidro ou plástico, devendo estes serem resistentes e estanques quando fechados. Os recipientes devem estar devidamente rotulados de forma a facilitar a identificação. O local de armazenamento (frigoríficos e armários) de material biológico assim como o laboratório onde se manipulam as amostras deve estar devidamente assinalado com o símbolo. Todas as pessoas no laboratório devem ser instruídas sobre a manipulação de amostras e devem permanecer no local o tempo estritamente necessário para a preparação e análise das amostras. 4

1.1 Cuidados gerais a ter As pessoas devem lavar as mãos antes e após a manipulação de agentes de risco e antes de saírem do laboratório. Não se deve levar qualquer objecto à boca no laboratório. Luvas apropriadas devem ser utilizadas em todos os procedimentos que possam envolver contacto directo ou acidental com materiais infecciosos em potencial ou amostras. Após a utilização, as luvas devem ser removidas e descartadas e as mãos devem ser bem lavadas. 5

Cont… Não tocar nos olhos, cabelos, boca ou nariz com as mãos durante o trabalho (principalmente quando estiver a utilizar luvas); Óculos de segurança ou outros aparatos de protecção devem ser utilizados quando houver necessidade de proteger os olhos e a face de respingos e fonte artificial de radiação de ultravioleta; Proteger qualquer tipo de ferimento exposto e não participar de actividades práticas se estas apresentarem risco de contaminação; Trabalhar sempre de maneira organizada, tranquila e metódica, evitando movimentos rápidos desnecessários. 6

Cont… No final de cada experiência, o executante é responsável por deixar o local de trabalho limpo e arrumado. O material que foi utilizado durante a experiência deve ser imediatamente limpo de acordo com os procedimentos gerais ou específicos para o tipo de amostras utlizadas. As pipetagens deverão sempre ser realizadas com dispositivos apropriados, nunca com a boca directamente. 7

Cont… O uso de agulhas e seringas hipodérmicas deve ser limitado. Elas não devem ser utilizadas como substitutas para pipetas ou micropipetas ou para qualquer finalidade que não seja injecção ou aspiração de fluidos dos animais do laboratório. No descarte (Recipiente/contentor imperfurável), as agulhas usadas não devem ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas das seringas ou manipuladas antes de serem desprezadas. Os materiais perfuro-cortantes devem ser manuseados cuidadosamente. 8

Cont… Instruções por escrito de como limpar todos os derrame devem ser desenvolvidas, afixadas no laboratório em local visível, informadas e seguidas. Líquidos contaminados devem ser devidamente descontaminados (química ou fisicamente) antes de serem descartados. A sinalização, contendo o símbolo internacional de risco biológico e advertência de área restrita, é obrigatória nas respectivas áreas e o acesso às mesmas deve ser limitado. Todos os contentores de material para descarte devem estar correctamente identificados, contendo inclusive o símbolo de biossegurança. 9

1.2. Manuseio de Produtos Químicos Regras de segurança para manuseiamento de produtos químicos; Nunca manusear produtos sem estar usando EPI, equipamento de segurança adequado para cada caso. Usar sempre material adequado. Não faça improvisações. Esteja sempre consciente do que estiver fazendo. Comunicar qualquer acidente ou irregularidade ao seu superior; Não pipetar, principalmente, líquidos cáusticos ou venenosos com a boca. Use os aparelhos apropriados; 10

Cont… Procurar conhecer a localização do chuveiro de emergência e do lave-lhos e saber como usá-lo correctamente; Nunca armazenar produtos químicos em locais impróprios; Não fumar nos locais de estocagem e no manuseio de produtos químicos; Não transportar produtos químicos de maneira insegura, principalmente em recipientes de vidro e entre aglomerações de pessoas. 11

Regras no manuseio de gases; Armazenar em locais bem ventilados, secos e resistentes ao fogo; Proteger os cilindros do calor e da irradiação directa; Manter os cilindros presos à parede de modo a não caírem; Somente transportar cilindros com capacete (tampa de protecção da válvula) e em veículo apropriado; Separar e sinalizar os recipientes cheios e vazios; Manter válvula fechada após o uso; Limpar imediatamente equipamentos e acessórios após o uso de gases corrosivos. 12

Cuidados a ter no manuseamento de amostras biológicas Animais de laboratório As características dos agentes zoonóticos requerem que os procedimentos laboratoriais que envolvem a manipulação de animais sejam realizados com cuidados específicos. Esta deverá ser realizada em instalações adequadas às espécies animais utilizadas e às experiências realizadas. Mais ainda, a manipulação dos animais deverá ser efectuada por indivíduos competentes e autorizados para o efeito, isto é, com formação em Experimentação Animal e reconhecidos como tal pela Direcção Geral de Pecuária. 13

Amostras humanas; Os tecidos ou as células humanas ou de outros primatas devem ser manuseadas de acordo com as práticas BSL-2. O principal risco em trabalhar com amostras humanas é a hepatite B e, em alguma extensão o HIV. Estes vírus são inactivados por certos detergentes e álcoois (sendo o propanol mais efectivo do que o etanol). Os técnicos/investigadores que trabalham com material humano deverão ser vacinados contra a hepatite B e devem ser medicamente assistidos após qualquer incidente que exponha o indivíduo a um agente patogénico. 14

1.4. Derrames no laboratório; Em situações gerais de derrames, deve-se colocar por cima do derrame toalhas de papel, adicionar o desinfectante diluído em quantidade suficiente que permita a inactivação dos microrganismos, remover todo o material utilizado na limpeza e coloca-lo no respectivo contentor para resíduos biológicos. Neste processo devem ser utilizadas luvas. No final, as mãos devem ser lavadas com sabão e água. 15

Cont… No laboratório onde se manipulam amostras biológicas deve existir o seguinte material: Desinfectante concentrado (por exemplo lixivia); Material absorvente (toalhas de papel, rolos de papel…); Luvas de látex; Pinças e outro material para recolher pedaços de vidro partido e material cortante. 16

Primeiras providências: Sólidos inflamáveis - tóxicos - corrosivos  Use equipamento de protecção individual (EPI) adequado;  Evite caminhar sobre o produto derramado;  Elimine todas as fontes de ignição;  Aterre os equipamentos usados.  Afaste materiais combustíveis  Pequenos derramamentos  Recolha o material com pá. 17

Gases inflamáveis-corrosivos - oxidantes Vazamento/Derramamento  Use equipamento de protecção individual (EPI) adequado;  Isole a área até que o gás tenha se dissipado (Pare o vazamento se possível);  Elimine todas as fontes de ignição;  Aterre os equipamentos usados;  Não jogue água directamente no ponto de vazamento;  Se possível, vire o recipiente de forma a permitir apenas a saída do gás;  Use neblina de água para desactivar/reduzir ou desviar a nuvem de gás de tubulações, etc.; 18

Líquidos inflamáveis - miscíveis ou não em água-tóxicos - corrosivos Vazamento/Derramamento Isole a área (Pare o vazamento se possível); Elimine todas as fontes de ignição; Aterre os equipamentos usados; Evite o espalhamento; Use espuma para supressão de vapores; Absorva o material com areia ou material não combustível; Recolha o material absorvido para descarte. 19

2. Corrente eléctrica e segurança no Laboratório Cuidados gerais Deve ‐ se manter a bancada de trabalho limpa e organizada. Esse procedimento auxilia a compreensão dos circuitos eléctricos que compõem as montagens experimentais e pode facilitar a identificação de eventuais erros; Os circuitos eléctricos devem ser montados de modo a facilitar a compreensão dos respectivos esquemas eléctricos. A organização das bancadas e das montagens dos circuitos é de grande importância na prevenção de acidentes; 20

2.2. Montagem dos circuitos e preparação para energização Antes de iniciar a montagem dos circuitos eléctricos deve ‐ se verificar o estado geral dos instrumentos de medição, condutores e terminais de conexão; Deve ‐ se proceder com a montagem das conexões eléctricas dos circuitos, com o painel de alimentação desligado; Visto que nos laboratórios didácticos é usual que haja mais de um valor de tensão disponível nas bancadas, deve ‐ se verificar o valor correto da tensão de alimentação dos circuitos eléctricos antes de colocá ‐ los em funcionamento; 21

Cont… Deve ‐ se verificar os circuitos eléctricos de forma minuciosa antes de colocá ‐ los em funcionamento. Além disso, antes de energizar a bancada e as montagens experimentais, a equipe de alunos deve solicitar a autorização do professor; O aluno responsável pela energização dos circuitos eléctricos, que integram as montagens experimentais, deve informar a todos os integrantes da sua equipe o momento em que pretenda energizá ‐ los. 22

2.3. Cuidados na operação de circuitos energizados Não se deve desconectar e/ou conectar terminais de fios condutores dos elementos que compõem os circuitos eléctricos ou dos instrumentos de medida, sob o risco de que esses terminais permaneçam energizados; Especificamente para o caso de circuitos com máquinas eléctricas rotativas, não se deve tentar segurar, nem mesmo tocar o eixo mecânico em rotação. Antes de tocar o eixo deve ‐ se assegurar de que o mesmo encontra ‐ se parado e que a máquina encontra ‐ se desligada. 23

3. Manuseamento de Microrganismos A manipulação de microrganismos deverá ser realizada de acordo com as classes de biossegurança estabelecidas pela OMS, como descrito anteriormente. Todas as culturas bacterianas deverão ser consideradas patogénicas e deverão ser manuseadas como tal. Assim, o técnico/investigador: Não deverá pipetar com a boca; Deverá lavar sempre as mãos antes de sair do laboratório; As pipetas e o material de vidro contaminados deverão ser desinfectados antes de serem lavados; 24

Cont… O material descartável contaminado deverá ser colocado em contentores adequados; As bancadas com material derramado deverão ser limpas com 70% álcool ou outras soluções adequadas; O operador deverá ser particularmente cuidadoso com os bacteriófagos para evitar contaminação das culturas. 25

Pela atenção dispensada Muito obrigado!!!