Vetores de Expressão em Escherichia coli

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Transcrição da apresentação:

Vetores de Expressão em Escherichia coli 1-Estratégia de clonagem no vetor pGEM-T 2-Vetores de expressão em Escherichia coli 3-Vetor caça promotores Edmar Vaz de Andrade www.ufam.edu.br/~edandrade

Mapa do vetor comercial pGEM-T ( Promega®) 1-Estratégia de clonagem no vetor pGEM-T Mapa do vetor comercial pGEM-T ( Promega®)

Principais componentes estruturais de um vetor de expressão em E. coli 2-Vetores de expressão em Escherichia coli Principais componentes estruturais de um vetor de expressão em E. coli

Seqüências consenso de promotores de E. coli 2-Vetores de expressão em Escherichia coli Região -35 TTGACA N17 TATAAT N6 Região a ser transcrita Região -10 Espaçadores Sítio de início de transcrição (+1) Seqüências consenso de promotores de E. coli

Seqüência sinal Shine-Dalgarno no mRNA bacteriano - Sub-unidade 30S 2-Vetores de expressão em Escherichia coli Seqüência sinal Shine-Dalgarno no mRNA bacteriano - Sub-unidade 30S

Mapa do vetor pKK232-8 (Amersham Bioscience®) 3-Vetor de clonagem caça promotores Mapa do vetor pKK232-8 (Amersham Bioscience®) Possui gene que codifica para a enzima cloranfenicol acetil transferase (cat) sem promotor