DIAGNÓSTICO CLÍNICO-LABORATORIAL DAS PARASITOSES Identificação macroscópica de vermes adultos (ou partes deles) eliminados pelo paciente ou encontrados em procedimentos cirúrgicos Identificação microscópica de formas evolutivas do parasita nas fezes, swab” anal, aspirado duodenal, biópsia retal, sangue, escarro, lavado brônquico, fragmentos de tecido, etc Detecção de Antígenos nas fezes (copro-antígenos) Diagnóstico por imagem Testes moleculares (PCR ou Hibridização) Sorologias (detecção de Anticorpos no soro ou líquor)

DIAGNÓSTICO CLÍNICO-LABORATORIAL DAS PARASITOSES Identificação macroscópica de vermes adultos Poderá ser feita pelo próprio paciente (ou responsável), pelo clínico durante o exame físico, durante uma cirurgia, uma autópsia ou no Laboratório de parasitologia Ascaris lumbricoides adulto: Cilíndrico, 15 a 45 cm de comprimento Eliminado através do ânus (mais raramente pela boca ou fossas nasais) ou encontrado em cirurgias por obstrução intestinal, no colédoco, apêndice, etc.

Identificação macroscópica de vermes adultos Ascaris lumbricoides

DIAGNÓSTICO CLÍNICO-LABORATORIAL DAS PARASITOSES Identificação macroscópica de vermes adultos Fêmeas de Enterobius ou Oxyurus vermicularis: Cilíndricas, com 8 a 10 mm de comprimento por 0,5 mm de largura. Parecem pequenos pedaços de linha de bordar esbranquiçados São observadas na região peri-anal de paciente com intenso prurido.

Identificação macroscópica de vermes adultos Fêmeas de Enterobius ou Oxyurus vermicularis:

PESQUISA DE OVOS DE OXIÚRUS OU DE TÊNIAS Método de Hall (Swab anal) ou Método de Graham (fita gomada). Pode ser efetuada pesquisa em material sub-ungueal SÓ TEM SENTIDO SE NÃO SE OBSERVARAM FÊMEAS DE OXIÚRUS NA REGIÃO PERI-ANAL OU PROGLOTES DE TÊNIAS EM ROUPAS OU FEZES

Identificação macroscópica de vermes adultos Tênias

DIAGNÓSTICO CLÍNICO-LABORATORIAL DAS PARASITOSES Identificação macroscópica de vermes adultos Proglotes de Tênia Estruturas retangulares planas,com 2-3 cm de comprimento por 1-1,5 cm de largura Podem sair espontaneamente (aparecendo entre as roupas íntimas -T. saginata, ou sendo eliminadas com as fezes -T. solium ou T. saginata) Permite diferenciar a espécie de Taenia: -Taenia saginata: numerosas ramificações uterinas, dicotômicas -Taenia solium: poucas ramificações, dendríticas

Identificação macroscópica de vermes adultos Proglotes de Tênia ELIMINAÇÃO DAS PROGLOTES GRÁVIDAS T. solium Grupos de 5 a 8, junto com as fezes T. saginata Uma por vez, deixam o intestino ativamente no intervalo das defecações Ramificações uterinas T. saginata: muitas, dicotômicas T. solium: menos, dendríticas

METODOS DE CONCENTRAÇÃO DAS FEZES Objetivo: concentrar ao máximo as estruturas parasitárias antes do exame microscópico DE SEDIMENTAÇÃO ESPONTÃNEA, para parasitas em geral (Hoffmann- Pons-Janer) DE SEDIMENTAÇÃO POR CENTRIFUGAÇÃO, para parasitas em geral (Ritchie) - DE FLUTUAÇÃO, para ovos leves – Ancilostomídios (Willis) - DE EXTRAÇÃO DE LARVAS PELO HIDRO-TERMO-TROPISMO para Strongyloides stercoralis (Rugai ou Baerman)

(hidro-termo-tropismo) METODOS DE CONCENTRAÇÃO DAS FEZES HOFFMANN (sedimentação) Universal H WILLIS (flutuação) Ancilostomídios RUGAI (hidro-termo-tropismo) S. stercoralis 42º C

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes (EAF) 1) Caracteres gerais - Cor - Aspecto 2) Exame bioquímico - pH - Pesquisa de Hb - Pesquisa de Substâncias Redutoras (açúcares) 3) Microscopia - Pesquisa de leucócitos - Pesquisa de Hemácias - Pesquisa de glóbulos de gordura

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes 1) Caracteres gerais Cor: -Normal: marrom (mais ou menos claro) -Esbranquiçado: acôlia-hipocôlia em colestases -Avermelhado-padrão heterogêneo: sangramentos baixos (neoplasia, reto-colite, shiguelose, salmonelose, amebíase) -Enegrecido: melena (sangue “digerido” pelo HCL)

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes 1) Caracteres gerais Aspecto e consistência: - Normal: consistência pastosa - Líquidas, em grande quantidade: a) Diarréias osmóticas por excesso de ingestão ou diminuição da digestão/absorção de carboidratos (deficiência de dissacaridases); a elevada osmolaridade retém água b) Diarréias secretórias ativas, pelo aumento de atividade da adenil-ciclase dos enterócitos, provocada por enterotoxinas (E. coli enterotoxigênica ou Vibrio cholerae). Há hipersecreção intraluminal de Na e Bicarbonato, e baixa reabsorção de Cl que provocam grande retenção de água.

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes 1) Caracteres gerais Aspecto e consistência: Aspecto muco-sanguinolento, flúidas, semi-fluídas ou pastosas (diarréias disentéricas): a) bactérias invasivas (Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp) ou trofozoítas de Entamoeba histolytica; b) fases de atividade da retocolite ulcerativa - Amolecidas (às vezes brilhantes por esteatorréia): diarréia prolongada por Giardia lamblia.

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes 2) Análise bioquímica Pesquisa de Hemoglobina (sangue oculto): Detecta perda de sangue, mesmo macroscopicamente “oculta” Indicações: - na investigação de anemias ferropênicas - para prevenção de câncer colo-retal -definir se uma diarréia é invasiva (amebíase, shiguelose, salmonelose) ou não (diarréia secretória ativa, giardíase)

PESQUISA DE SANGUE OCULTO NAS FEZES Reação AgHb/Ac anti-Hb humana Método clássico (oxidação do guáiaco)A: teste negativo; B: teste positivo Teste imunológico (com Ac monoclonais anti-Hb humana) Precisa dieta isenta de carne 3 dias antes para melhorar a especificidade Não precisa dieta prévia PARA AMBOS OS MÉTODOS SOLICITAR COLETA SERIADA DE 3 AMOSTRAS DE FEZES FRESCAS

PESQUISA DE SANGUE OCULTO NAS FEZES Teste Imunológico (ELISA por imunocromatografia) Resultado positivo Resultado negativo

PESQUISA DE SANGUE OCULTO NAS FEZES Teste Imunocromatográfico-ELISA Conteúdo da membrana Resultado negativo Resultado positivo

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes Pesquisa de substâncias redutoras (açucares): È baseada na redução que os açúcares produzem num composto de cobre, que muda de cor. Na deficiência de dissacaridases (mais freqüentemente lactase) o açúcar está presente nas fezes e provoca uma diarréia osmótica. pH fecal: Fezes muito ácidas (pH inferior a 5,0): diarréias osmóticas favorecem uma intensa fermentação bacteriana e produção de ácidos; Fezes muito alcalinas (pH acima de 7,0): diarréias secretórias ativas por Escherichia coli enterotoxigênica com elevada concentração de Na e Bicarbonato.

FITAS REATIVAS UTILIZADAS NO EAF Área da fita para detecção de glicose A B A B Determinação do pH fecal A: amostra ácida; B: amostra alcalina Pesquisa de substâncias redutoras A: amostra positiva; B: amostra negativa

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes 3) Exame microscópico a) Pesquisa de leucócitos: Positiva nos processos inflamatórios intestinais: disenterias bacterianas (Shigella spp., Salmonella spp., Campylobacter spp.) e fase ativa da Retocolite ulcerativa. Curiosamente, na disenteria amebiana é negativa, devido à destruição dos leucócitos por substâncias liberadas por E. histolytica. b) Pesquisa de hemácias c) Pesquisa de glóbulos de gordura com corante específico (Sudam III); é positiva nos casos de síndrome de malabsorção (pancreatite crônica alcoólica, Mucoviscidose) e na dissabsorção por giardíase intensa.

PESQUISA DE LEUCÓCITOS NAS FEZES Presença de leucócitos em fezes de enterite invasiva por Shigella flexnerii

Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes EXEMPLO DE RESULTADO DE EAF Thiago Cerqueira (3 anos) Pesquisa de Elementos Anormais nas Fezes 1) Caracteres gerais - Cor: amarelo claro, presença de raias de sangue - Aspecto: fluído 2) pH: 6,5 3) Pesquisa de Hb: positiva 4) Pesquisa de Subst. Redutoras: negativa 5) Pesquisa de leucócitos: positiva 6) Pesquisa de Hemácias: positiva 7) Pesquisa de glóbulos de gordura: negativa Niterói, 04/03/08

(AGLUTINAÇÃO DO LÁTEX) PESQUISA DE ROTAVÍRUS (AGLUTINAÇÃO DO LÁTEX) Amostra positiva Amostra negativa

EXEMPLO DE PEDIDO MÉDICO EM CASO DE DIARRÉIA AGUDA Daniel Venturini (6 meses) Fezes - EAF - Pesquisa de Rotavirus - Coprocultura Indicação clínica: febre, vômitos e Diarréia; Rotavirus? Enterite bacteriana? Niterói, 25/06/07