Licenciatura em Ciências da Saúde

Apresentação em tema: "Licenciatura em Ciências da Saúde"— Transcrição da apresentação:

1 Licenciatura em Ciências da Saúde
Microbiologia Agentes antimicrobianos Aida Duarte 2015

2 Aida Duarte LCS FFULisboa

3 Antibióticos Aida Duarte LCS FFULisboa
Anne E Clatworthy, Emily Pierson & Deborah T Hung. Targeting virulence: a new paradigm for antimicrobial therapy. Nature Chemical Biology 3, (2007) Aida Duarte LCS FFULisboa

4 Modo de acção dos antibióticos
síntese proteica ácidos nucleicos metabolismo Parede celular membrana celular peptidoglicano Anne E Clatworthy, Emily Pierson & Deborah T Hung. Targeting virulence: a new paradigm for antimicrobial therapy. Nature Chemical Biology 3, (2007) Aida Duarte LCS FFULisboa

5 X Mecanismos de Resistência Antibiótico exerce pressão selectiva
Diminuição da concentração intra-celular Inactivação Efluxo X Alteração do local de acção Bactéria utiliza estratégias para resistir Aida Duarte LCS FFULisboa

6 Agentes antimicrobianos
Resistência Bacteriana Intrínseca resistência ubíqua entre espécies ou géneros Mycoplasma spp. β-lactâmicos R Adquirida Aquisição de genes de resistência Mutações espontâneas em genes endógenos Aquisição de sequências exógenas Expressão dos genes resistência Aida Duarte FFUL - LCS

7 Mecanismos de Resistência
Os determinantes de resistência podem ser facilmente transmitidos entre espécies microbianas Ilhas genómicas transposão integrão Aida Duarte LCS FFULisboa

8 Antibióticos Aida Duarte LCS FFULisboa

9 -lactâmicos Aida Duarte LCS FFULisboa Aida Duarte LCS FFULisboa

10 Mecanismos de Resistência
-lactâmicos Mecanismos de Resistência Hidrólise enzimática Formação de um éster entre a amida (N) do antibiótico -lactâmico serina da enzima b-lactamase N O COOH S HN OH H2O Antibiótico Inactivo Adaptado D M Livermore Aida Duarte LCS FFULisboa

11 -lactâmicos  -lactamases A B C D Penicilinases ESBLs
Cefalosporinas 1 e 2ª geração 3 e 4ª geração Inibidores de b-lactamases Carbapenemos Classe Penicilinases ESBLs A B Carbapenemases (metalo-b-lactamases) C D Cefalosporinases Cefalosporinases hiperprodução Oxacilinases Carbapenemases do grupo Serina  -lactamases Aida Duarte LCS FFULisboa

12 Antibióticos Síntese da parede celular Fosfomicina
Porina Outer membrana Peptidoglicano Membrana citoplasmática enzimas piruvato-UDP-N-acetilglucosamina-transferases ácido N-acetilmurâmico Aida Duarte LCS FFULisboa

13 Glicopeptidos Síntese da parede celular Vancomicina PBP PBP
Peptidoglicano membrana citoplasmática PBP PBP Bactérias resistentes Bactérias de Gram negativo Aida Duarte LCS FFULisboa

14 Mecanismos de Resistência
Glicopeptidos Enterococcus spp Mecanismos de Resistência Primeira descrição 1988 França Leclecq & Courvalin N.Engl. J. Med, 1988 1988 Reino Unido Uttley et al Lancet,1988 Resultante de modificação do alvo (D-ala-D-ala  D-ala-D-lys) Determinantes genéticos (vanA, vanB) em transposões e em plasmídeos conjugativos Gene vanA transferível in vitro para Staphylococcus aureus Aida Duarte LCS FFULisboa

15 Daptomicina Membrana citoplasmática
Liga-se a componente lipofilica da membrana, cálcio dependente, provoca a saida de iões potássio Lipopeptidos Setembro 2003 S.aureus resistente à meticilina Enterococcus spp Clostridium difficile Silverman JA, A A C. 2001 Aida Duarte LCS FFULisboa

16 Antibióticos Inibição da síntese proteica Aida Duarte LCS FFULisboa

17 Aminoglicosides Sintese proteica Mecanismos de Resistência
Streptomicina (1944) Neomicina (1949) Bactérias resistentes Canamicina (1957) Anaeróbios Gentamicina Streptococcus Enterococcus Tobramicina Amicacina Netilmicina (1978) metabolismo aeróbio Mecanismos de Resistência Adenilação AAC(3) I-VI Acetilação Fosforilação APH (2), (3) I-VII APH(2”)-I aph(2”)-Ia Gentamicin, Tobramycin, Amikacin APH(3’)-I aph(3’)-Ia, aph(3’)-Ib, aph(3’)-Ic Kanamycin, Neomycin, Paromomycin APH(3’)-III aph(3’)-IIIa Commonly found in S. aureus and E. faecalis Kanamycin, Neomycin, Amikacin, Gentamicin Aida Duarte LCS FFULisboa

18 Mecanismos de resistência
Macrólidos Eritromicina 1951 Azitromicina Claritromicina Mecanismos de resistência Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus mef mrs Efluxo genes Alteração do local de ligação no ribossoma Enzimas: Metilase gene erm Streptococcus pneumoniae Esterase Enterobactérias Aida Duarte LCS FFULisboa

19 Quinolonas Replicação do DNA Inibem a DNA girase bacteriana
DNA girase regula super-enrolamento DNA Gyrase enzyme DNA Gyrase+ QUINOLONE Corte das cadeias de DNA e posterior ligação Impedem o enrolamento do DNA Aida Duarte LCS FFULisboa 19 19

20 Quinolonas Resistência Cromossomal
QRDR – quinolone resistance determining region Mutações nos genes das enzimas DNA gyrase Local de ligação da quinolona DNA topoisomerase IV Aida Duarte LCS FFULisboa 20 20

21 Mecanismos de Resistência
Resistência plasmidica qnrA, qnrB, qnrS Distribuição mundial de genes inseridos em plasmídeos gene aac(6)- Ib Aminoglicosides tobramicina, amicacina, canamicina Duas alterações gene aac(6)- Ib-cr MIC 3x ciprofloxacina e norfloxacina Quinolonas Robiocsek et al, Nat Med, 2006 Aida Duarte LCS FFULisboa 21 21

22 Mecanismos de Resistência
Diminuição da permeabilidade Parede celular Nova porina Antibiótico aminoglicosidos Quinolonas Klebsiella pneumoniae OmpK35 and OmpK36 -lactâmicos Enterobacter spp . OmpF and OmpC imipenemo, meropenemo, cefepime Pseudomonas spp . imipenemo Opr D Aida Duarte LCS FFULisboa

23 Mecanismos de Resistência
Mecanismo de efluxo Entrada Saída Parede celular Porina Antibiótico Bomba Activa Gene no plasmideo Minociclina Tigeciclina Enterobactérias (Escherichia coli, Enterobacter spp) AcrAB-TolC e AcrEF-TolC tolueno, quinolonas P.aeruginosa MexAB-OprM meropenemo Aida Duarte LCS FFULisboa

24 Susceptibilidade aos antibióticos
Concentração Mínima Inibidora - CMI Método de diluição macro diluição microdiluição Método de difusão CMI CMB E-test Concentração Mínima Bactericida- CMB Aida Duarte LCS FFULisboa

25 Susceptibilidade aos antibióticos
correlação entre os valores críticos da CMI e os diâmetros dos halos de inibição CMI < nível sérico sensível CMI > nível sérico resistente CMI ~ nível sérico intermédio CLSI European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing - EUCAST Clinical and Laboratory Standards Institute Aida Duarte LCS FFULisboa

26 Mecanismos de Resistência
β-lactamase de espectro alargado ESBL Hidrolizam as cefalosporinas de 3ª geração Caz Ctx Atm Fep Amc Inibição pelo ácido clavulânico             GCGCTATAGCTTAATTGGGCGCTA |||||||||||||||||||||||| CGCGATATCGACTTAACCCGCGAT alteração da proteína  mutação de um nucleótido Aida Duarte LCS FFULisboa

27 Mecanismos de Resistência
a detecção de uma bactéria produtora de β-lactamases pode ser difícil Fox Ipm Caz Ctx Ctx Amc Ctx Amc Caz Caz diminuição da distância entre os discos Imipenemo, cefoxitina são indutores de AmpC não se observa o efeito sinérgico produtora de ESBL Cefalosporinase Aida Duarte LCS FFULisboa

28 Agentes antimicrobianos
Bactérias multiresistentes Resistência Bacteriana 60% das infecções nosocomiais ESBL Enterobactérias: Klebsiella pneumoniae Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter baumannii Cefalosporinas Carbapenemos Aminoglicosidos Quinolonas Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) Enterococcus resistente à vancomicina (VRE) Aida Duarte LCS FFULisboa

29 Agentes antimicrobianos
Dose? Farmacocinética Aida Duarte – LCS- FFUL

30 Resistência aos antibióticos
3030 Resistência aos antibióticos usem o antimicrobiano por via oral, intravenosa mas nunca por via das dúvidas!!!! Aida Duarte LCS FFULisboa