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Biologia molecular Profa Msc Nadia Morais Biologia molecular Profa Msc Nadia Morais.

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1 Biologia molecular Profa Msc Nadia Morais Biologia molecular Profa Msc Nadia Morais

2 Nascimento de Louise Brown em 1978 Steptoe e Edwards A fertilização in vitro e transferência de embrião (FIV-TE) Tratamento dos casos de infertilidade tubária, ou seja, para aquelas pacientes em que as tubas uterinas estavam ausentes ou irreparavelmente obstruídas O aprimoramento das técnicas de FIV ampliou as suas indicações e permitiu o seu uso para o tratamento da infertilidade de outras etiologias. FIV

3 A fertilização in vitro, denominada "Bebê de Proveta", deve-se ao fato da fecundação do óvulo pelo espermatozóide ocorrer fora do corpo, em laboratório, ou seja, in vitro. Os embriões resultantes da fertilização in vitro são transferidos para o útero aproximadamente 72 horas após a captação de óvulos.

4 Etapas da fertilização in vitro e transferência de embriões 1.Indução da ovulação, para estimular amadurecimento de vários óvulos 2.Monitorização do crescimento folicular com ecografia transvaginal. 3.Coleta de óvulos por ecografia transvaginal (mediante analgesia, tempo médio minutos). 4.Coleta do sêmen e capacitação espermática, no mesmo dia da coleta dos óvulos. 5.Inseminação in vitro: identificação e classificação dos óvulos com posterior inseminação com o sêmen capacitado. 6.Transferência de embriões para o útero materno, geralmente 3 dias após a fertilização. 7.Suporte da fase lútea 8.Diagnóstico de gestação.

5 Indutores de ovulação : Medicamentos utilizados para estimular a ovulação 1- Pode ser a base de citrato de clomifeno: - Clomid, Indux, Serophene Indução mais leve, indicado para problemas ovulatórios mais simples 2- Pode ser a base de Gonadotrofinas – FSH e LH - Gonal, Menopur Indução utilizada em casos mais severos em que o citrato de clomifeno não obteve resultados Podem causar dor, desconforto abdominal, inchaço, dores nos sérios, gases, dor de cabeça, enjôo, corrimento escuro, atraso menstrual

6 Indicações para FIV Obstrução tubária bilateral é a indicação clássica para FIV. Atualmente: Infertilidade devido a fator masculino, onde se consegue recuperar aproximadamente 1 milhão de espermatozóides após o preparo Infertilidade sem causa aparente. Todas as causas de infertilidade que não responderam a outros tipos de tratamento podem ser tratados pela fertilização in vitro e transferência de embriões.

7 INSEMINAÇÃO IN VITRO O líquido folicular aspirado chega ao embriologista para identificação e classificação da maturidade dos óvulos. A maturidade do óvulo é determinada pela morfologia do complexo cumulus- corona em sua volta e pela presença ou ausência de vesícula germinativa e primeiro corpúsculo polar. Os óvulos são classificados como imaturos ou em prófase, metáfase I e metáfase II ou maduros. Os óvulos maduros ficam algumas horas em cultura sendo então inseminados na proporção de aproximadamente 100 mil espermatozóides móveis para cada óvulo.

8 Quinze a 19 horas após a inseminação os óvulos são examinados ao microscópio em busca do sinal de fertilização (presença dos pró-núcleos masculino e feminino). Vinte e quatro horas após a inseminação observa-se a presença de pré-embriões, divididos em duas células. A transferência dos pré-embriões realiza-se 48 a 72 horas após a inseminação, com pré- embriões com quatro, oito ou mais células. A. 16 hs pós fertilização (zigoto) B. Com 2 células C. Com 4 células (48 hs) D. Com 8 células (72 hs) E.Fase de Blastocisto (5º dia)

9 Transferência de embriões Neste procedimento, similar a um exame ginecológico de rotina: -Coloca-se o espéculo na vagina e com um cateter adequado coloca-se os pré-embriões na cavidade uterina. -O catéter de transferência é extremamente delicado, existindo diversos modelos. - A transferência é indolor, portanto não necessita de anestesia ou analgesia. -Após o procedimento a paciente fica aproximadamente 30 minutos em repouso.

10 Resultados da FIV - TE Os índices de gestação com a FIV-TE são tão bons como os da natureza. Um casal fértil normal, com 20 anos, fazendo sexo regularmente, tem a cada mês em torno de 16% de chance de conceber. Com o procedimento FIV-TE, após a transferência de 3 embriões os índices de sucesso por ciclo de tratamento ficam, também, em torno de 20%-30%. Depois de quatro ciclos de tratamento o índice cumulativo de gestação chega a 50% por casal em média. A idade da mulher é fator importante nas taxas de gestação.

11 ICSI (Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides) Também é uma técnica de fertilização in vitro, pois a fertilização ocorre fora do corpo A técnica de Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides - ICSI, oferece um tratamento viável mesmo para os mais difíceis casos de infertilidade masculina. Utiliza-se um microscópio potente e micromanipuladores capazes de segurar um único óvulo na extremidade de uma delicada pipeta de sucção e através de outra pipeta promove-se a penetração do espermatozóide selecionado para dentro do óvulo.

12 Esse procedimento, embora complexo, é uma excelente alternativa para homens que antes deveriam ter no mínimo 1 milhão de espermatozóides móveis no ejaculado. A ICSI também possibilitou a fertilização de óvulos com espermatozóides que podem ser aspirados do epidídimo, técnica conhecida como MESA ou ainda diretamente dos testículos através de uma minúscula biópsia - TESA. A. À esquerda pipeta que segura o óvulo, à direita pipeta que irá injetar o espermatozóide (seta mostra espermatozóide dentro da pipeta injetora) B. Pipeta injetora penetrando no óvulo C. Pipeta injetora dentro do óvulo D. Pipeta injetora sendo retirada do óvulo E.Óvulo após a injeção

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