A apresentação está carregando. Por favor, espere

A apresentação está carregando. Por favor, espere

CINÉTICA ENZIMÁTICA. Cinética Enzimática Estudo da velocidade de uma reação química que ocorre na presença de uma enzima.

Apresentações semelhantes


Apresentação em tema: "CINÉTICA ENZIMÁTICA. Cinética Enzimática Estudo da velocidade de uma reação química que ocorre na presença de uma enzima."— Transcrição da apresentação:

1 CINÉTICA ENZIMÁTICA

2 Cinética Enzimática Estudo da velocidade de uma reação química que ocorre na presença de uma enzima

3 . No início da reação a quantidade de substrato é constante, já que a quantidade de substrato é muito maior do que a de enzima..Determina-se a velocidade inicial de reação, V o,para uma determinada [S]..Obtêm-se valores para várias concentrações de substrato, mantendo constante a concentração de enzima. A concentração de substrato influencia a velocidade de uma reação Estudo da relação entre a concentração e a velocidade: Assim podemos traçar os valores num gráfico, em que exprimimos V o como função de [S] Velocidade vs. Concentração

4 Dados: Para [S] baixas, V o aumenta quase linearmente Para [S] maiores, V o aumenta mais gradualmente Para [S] mais elevadas, atinge-se uma velocidade máxima, V máx. Velocidade vs. Concentração

5 Comportamento é explicado pela formação do complexo enzima-substrato ES Equação de Michaelis-Menten 1. O enzima liga-se ao substrato reversivelmente formando o complexo ES Reação rápida E + S ES k1k1 k2k2 2. O complexo ES dissocia-se em enzima livre e produto da reação Reação mais lenta ES E + P k3k3.A reação 2, mais lenta, limita a velocidade global da reação..A velocidade é proporcional à concentração do complexo ES..A cada momento a enzima existe na forma livre e no complexo ES..A velocidade máxima (V máx ) da reação ocorre quando todos as enzimas estão associadas as moléculas de substrato.

6 Dedução da Equação Michaelis-Menten A curva que representa a relação entre [S] e V o tem forma idêntica para a maioria das enzimas. Esta curva pode ser descrita algebricamente pela equação de Michaelis-Menten. A equação de Michaelis-Menten é O passo limitante da velocidade das reações enzimáticas é a quebra do complexo ES para formar o produto e a enzima livre.

7 onde [E] e [S] são as concentrações da enzima e do substrato livres. [E T ] - concentração total da enzima A concentração de enzima livre é, assim, [E T ]-[ES] E + S ES P + E k1k1 k2k2 k3k3 Reações de formação e desassociação do complexo ES: Dedução da Equação Michaelis-Menten Pressuposto: não há transformação de produto em substrato

8 Dedução da Equação Michaelis-Menten Etapa 1: velocidade de formação de ES = k 1 [E][S] Etapa 2: velocidade de decomposição de ES = k 2 [ES] Etapa 3: velocidade de consumo de ES = k 3 [ES] velocidade de formação de P = k 3 [ES] E + S ES P + E k1k1 k2k2 k3k3 Velocidade de formação de ES é formada na etapa 1 e consumida nas etapas 2 e 3. velocidade de formação ES = k 1 [E][S] - k 2 [ES] - k 3 [ES] [ES] é constante, ou seja, a velocidade de degradação e formação de ES são iguais. Aplicando a aproximação do estado estacionário. k 1 [E][S] = k 2 [ES] + k 3 [ES]

9 [E] = [E T ]-[ES] e [S] [S T ] [S] = [S T ] - [ES] porque [S T ] >>> [E T ] Dedução da Equação Michaelis-Menten Substituindo na equação: k 1 ([E T ] – [ES]) [S] = k 2 [ES] + k 3 [ES] k 1 [E T ] [S] - k 1 [ES] [S] = [ES] (k 2 + k 3 ) k 1 [E T ] [S] = [ES] (k 2 + k 3 ) + k 1 [ES] [S] k 1 [E T ] [S] = [ES] {(k 2 + k 3 ) + k 1 [S]} k 1 K m = constante de Michaelis É uma medida da estabilidade do complexo enzima-substrato

10 velocidade inicial de formação de P é V 0 = k 3 [ES], então: V máx A velocidade é máxima quando [ES]=[E T ]! Esta forma da equação de Michaelis-Menten chama-se equação de Lineweaver-Burk Dedução da Equação Michaelis-Menten

11 Equação de Lineweaver-Burk Gráfico de 1/[V 0 ] em função de 1/[S] Coeficiente angular: K m /V máx A intersecção da reta no eixo 1/V 0 corresponde ao valor 1/V máx Qdo y=0 1/V 0 = 0; então a intersecção com o eixo 1/[S] corresponde a -1/K m


Carregar ppt "CINÉTICA ENZIMÁTICA. Cinética Enzimática Estudo da velocidade de uma reação química que ocorre na presença de uma enzima."

Apresentações semelhantes


Anúncios Google