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1
Síntese de DNA Síntese de oligonucleotídeos
Sintetizadores automáticos 3’ 5’ Primers ou sondas
2
Síntese de cDNA Transcriptase reversa RNA DNA
3
Reação em cadeia da Polimerase PCR
Kary Mullis 1983 Elementos necessários: DNA, dNTPs, polimerase e primers Amplificação em PG
5
Sequenciamento do DNA Frederick Sanger 1977
Seqüenciamento manual: 4 reações com nucleotídeos modificados (didesoxi) e marcados (P32) Seqüenciadores automáticos
8
Arrays Expressão e integração dos genes
Microarrays – placas de vidro, nylon ou sílica com sondas fixadas
11
Aplicações Determinar genes ativados em momentos e/ou situações diferentes Comparar seqüências de alelos ligados a patologias Determinar medicamentos adequados Prever riscos de exposição a determinadas substâncias
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