ANATOMIA PATOLÓGICA Conceito:

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1 ANATOMIA PATOLÓGICA Conceito:
Consiste no estudo macroscópico e microscópico de amostras de tecidos, como fragmentos de tecidos colhidos numa autópsia, peças cirúrgicas e biópsias. Em organismos vivos, são os exames anátomo-patológicos que permitem identificar, por exemplo, uma cirrose hepática – através da biópsia de um fígado – ou um câncer de mama – através da biópsia da mama. Para isso, segue-se uma metodologia muito específica.

2 Em primeiro lugar, começa por fixar, desidratar e diafanizar (tornar transparente) o tecido a analisar, incluindo-o, em seguida, em parafina (um tipo de cera). Em seguida, cortam em secções ultrafinas o bloco formado (com a ajuda de um aparelho designado por micrótomo), as quais são colocadas em lâminas e coradas com substâncias corantes que permitem evidenciar a estrutura dos tecidos, conjunto de células, pigmentos e microorganismos. Como última etapa, é realizada a análise das lâminas pelo médico patologista, ao microscópio e avaliando-se os resultados obtidos.

3 Cortes para serem processados

4 Histotécnico – processamento dos materiais

5 Histotécnico – processamento dos materiais

6 Histotécnico – processamento dos materiais

7 Formas para inclusão em Parafina

8 Processo de inclusão dos materiais

9 Processo de inclusão dos materiais

10 Materiais incluídos

11 Micrótomo

12 Corte do bloco de parafina

13 Corte do bloco de parafina

14 Corte do bloco de parafina

15 Corte do bloco de parafina

16 Montagem do carrinho de lâminas para corar

17 Bateria de coloração HE

18 Lâminas coradas e montadas

19 Recepção e tratamento prévio do material:
O material coletado por médico deve ser rapidamente acondicionado em frasco de boca larga ou em outro recipiente adequado contendo solução de FORMOL a 10%, de preferência tamponado. O frasco deve ser correta e imediatamente identificado com o nome do paciente. É obrigatório o preenchimento da ficha de solicitação do exame ou o pedido do médico, constando todos os dados pertinentes ao material (natureza e localização) e ao paciente, que contribuam para a correlação anátomo-clínica e conclusão diagnóstica final, tais como o problema clínico, informações laboratoriais e de imagens, hipóteses diagnósticas e todas as dúvidas que o exame deve tentar responder.

20 Também devem constar claramente a identificação do médico solicitante e seu telefone e/ou ramal de contacto fácil, caso haja necessidade de informações complementares ou discutir diagnósticos diferenciais, entre outras eventualidades. O fragmento deve ser retirado de maneira a evitar-se que a pinça deixe marcas permanentes no tecido. O instrumento usado (bisturi, punch,etc...) deve estar afiado para não esmagar o fragmento, produzindo artefatos de difícil correção durante o processamento. O fragmento deve ser colocado imediatamente no fixador, nele podendo permanecer por longo tempo.

21 Fixação: O melhor fixador é o formol a 10% tamponado, isto é, diluído em tampão fosfato, com pH de aproximadamente 7,2 porque este é o tampão mais encontrado nos fluidos orgânicos. O uso do formol tamponado é desejável porque preserva os tecidos, mantendo suas características bioquímicas, permitindo a realização de colorações de melhor qualidade e a obtenção de melhor resultado nas reações imuno-histoquímicas. O formol a 10%, não tamponado, torna-se mais ácido com o passar dos dias, comprometendo a qualidade de qualquer coloração ou estudo imuno-histoquímico que se torne necessário.

22 O volume a ser utillizado deve ser 10 a 20 vezes o volume do espécime
O volume a ser utillizado deve ser 10 a 20 vezes o volume do espécime. O tempo de fixação é de 1 a 2 horas para cada milímetro de espessura de tecido. No entanto, na impossibilidade da obtenção de formol a 10% tamponado, deve-se continuar utilizando o formol a 10%, que pode ser facilmente preparado:

23 Diluir uma parte de formol bruto (formaldeído a 40%) em nove partes de água corrente
Exemplo:

24 TIPOS DE FIXADORES FÍSICOS: Calor - Fixação de bactérias e leveduras QUÍMICOS: Substâncias químicas que preservam a estrutura e composição química dos tecidos.
Álcoois
Fixadores com mercúrio
Fixadores com ácido pícrico
Formaldeído
Glutaraldeído
Tetróxido de ósmio
Acetato de uranilo
Ferricianeto de potássio

25 OBSERVAÇÕES: A fixação com álcool etílico deve ser feita apenas em casos especiais, pois torna o tecido muito duro, dificultando a realização dos cortes histológicos. É necessária a utilização do álcool etílico como fixador nas biopsias de pacientes com suspeita de gota, pois preserva os cristais de urato que poderão ser vistos ao microscópio de luz polarizada. A fixação em formol a 10%, que é uma solução aquosa, dissolve esses cristais. Fixação de fragmentos da placa ungueal - Fixar o fragmento durante 12h numa solução de glicerina a 10% com formol tambem a 10%.

26 Importância da Fixação dos materiais

Preservação das estruturas o mais semelhante à sua situação in vivo
Consistência “endurecer os tecidos e as células”
Impedir a autólise
Impedir a actividade e a proliferação de bactérias
Aumentar a afinidade das estruturas celulares para os corantes citológicos

27 Fatores que influenciam a fixação dos materiais

Tampão
PH
Osmolaridade
Tamanho da peça
Volume e concentração do fixador
Velocidade de penetração do fixador
Temperatura
↑TºC
-
↑velocidade de fixação  ↓TºC
 ↓alterações autolíticas