NITROSILAÇÃO : UM NOVO MECANISMO DE RESISTÊNCIA A INSULINA. Aluno : Marco Antonio de Carvalho Filho Orientador : Mário José Abdalla Saad Departamento de Clinica Médica FCM - UNICAMP

SÍNDROME METABÓLICA PRESENÇA DE 3 OU MAIS DOS CRITÉRIOS ABAIXO Obesidade abdominal: CA > 102 cm-homem e > 88 mulher Hipertrigliceridemia: > 150 mg/dL HDL < 40 mg/dL-homem e < 50 mg/dL-mulher PA > 130 / 85 mm Hg Glicose plasmática de jejum > 110 mg/dL

Glicose Captação de glicose (músculo e adipócitos) + Captação de aminoácidos (todas as células) + Lipogênese Insulina + Síntese de glicogênio (músculo e fígado) + S - S - Efeito anti-lipólise S-S S-S + Diferenciação pré-adipócito adipócito Lys - P Apoptose + Síntese protéica (todas as células) +/- + Expressão gênica (todas as células) Síntese de DNA (todas as células)

MECANISMO MOLECULAR DE AÇÃO DA INSULINA subunidade a S - S TRANSPORTE GLICOSE Glicose S-S S-S GLUT 4 PO4 ATP P subunidade b IRS-1/2 PO4 PI 3 quinase GLUT 4 AKT SINT. DE GLICOGÊNIO LIPOGÊNESE

ERA PRÉ-AGRICULTURA Escassez de alimentos Doenças infecciosas

Evolução da População Indígena na América nos Séculos XVI e XVII México – 1519: 22.000.000 de nativos 1600: 1.000.000 de nativos Peru – 1520: 9.000.000 de nativos 1620: 600.000 de nativos

Índios Pima - México

Índios Pima: EUA-Arizona

NO NITROSILAÇÃO PROTEÍNA PROTEÍNA NIROSOTIOIS GSNO L - ARGININA NO - SINTASE L - CITRULINA MODULAÇÃO + MODULAÇÃO – PROTEÍNA NITROSILAÇÃO ( CISTEÍNA ) SNO PROTEÍNA

OBJETIVOS Investigar os efeitos de drogas doadoras de NO (GSNO) no metabolismo de glicose, e S-nitrosilação de proteínas da via de sinalização da insulina em músculo isolado e tecido muscular de ratos intactos. Investigar se a iNOS , induzida em diversas situações de resistência a insulina, está envolvida com S-nitrosilação de proteínas da via de sinalização de insulina e com resistência a ação celular deste hormônio.

Biotinilação de nitrosocisteínas MATERIAIS E MÉTODOS Imunoblotting Biotinilação de nitrosocisteínas

RESULTADOS – MÚSCULO ISOLADO CAPTAÇÃO DE GLICOSE - INSULINA + GSNO S-NITROSILAÇÃO - IR C GSNO ATIVIDADE TIROSINA-QUINASE - IR CONTROLE GSNO - A I I/A SINALIZAÇÃO INSULINA - + CONTROLE GSNO IR IRS-1 pAkt SÍNTESE DE GLICOGÊNIO - INSULINA + GSNO

RESULTADOS – TECIDO MUSCULAR CONTROLE GSNO kITT S-NITROSILAÇÃO C GSNO IR ATIVIDADE TIROSINA-QUINASE - IR CONTROLE - A I I/A IRS-1 QUANTIDADE DE PROTEÍNA – IRS-1 C GSNO SINALIZAÇÃO INSULINA - + CONTROLE GSNO IR IRS-1 pAkt Akt C GSNO ATIVIDADE QUINASE - Akt INSULINA - + CONTROLE

RESULTADOS – DIETA HIPERLIPÍDICA CONTROLE DH kITT S-NITROSILAÇÃO C DH IR SINALIZAÇÃO INSULINA + IRS-1 C DH INSULINA + iNOS C DH IRS-1 C DH Akt C DH pAkt INSULINA +

RESULTADOS – ob/ob kITT S-NITROSILAÇÃO SINALIZAÇÃO IR IRS-1 iNOS Akt C ob/ob ASO S-NITROSILAÇÃO SINALIZAÇÃO IR INSULINA + C ob/ob ASO IRS-1 INSULINA + C ob/ob ASO iNOS C ob/ob ASO Akt pAkt INSULINA + C ob/ob ASO IRS-1 C ob/ob ASO

RESULTADOS – iNOS-/- X LPS kITT C LPS iNOS-/- S-NITROSILAÇÃO SINALIZAÇÃO IR C LPS iNOS-/- INSULINA + IRS-1 INSULINA + C LPS iNOS-/- iNOS C LPS iNOS-/- Akt pAkt INSULINA + C LPS iNOS-/- IRS-1 C LPS iNOS-/-

RESULTADOS – DIETA HIPERLIPÍDICA / ROSIGLITAZONA kITT C DH ROSI S-NITROSILAÇÃO SINALIZAÇÃO IR INSULINA + C DH ROSI IRS-1 INSULINA + C DH ROSI iNOS C DH ROSI Akt pAkt INSULINA + C DH ROSI IRS-1 C DH ROSI

RESISTÊNCIA A INSULINA CONCLUSÃO insulina S-S S - S a b RESISTÊNCIA A INSULINA SNO L - ARGININA NO NO - SINTASE IRS-1/2 YMXM Akt L - CITRULINA SNO SNO