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Camila Indiani de Oliveira Seminário de Avaliação PRODOCs 1 e 2 Responsável Institucional: Mitermayer G. dos Reis Instituição: CPqGM/FIOCRUZ Departamento:

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1 Camila Indiani de Oliveira Seminário de Avaliação PRODOCs 1 e 2 Responsável Institucional: Mitermayer G. dos Reis Instituição: CPqGM/FIOCRUZ Departamento: LIP Área/Subárea: Parasitologia/Parasitologia Humana Título do Projeto:Caracterização dos componentes da glândula salivar de Lutzomyia intermedia e de Lutzomyia whitmani e caracterização de suas propriedades imunomoduladoras

2 Introdução I Fonte: WHO/TDR e MS/SVS Prioridade nos programas de controle da OMS

3 Introdução II

4 Introdução III Lesão tecidual Hemostasia Vasoconstrição Agregação Plaquetária Coagulação Modificação do microambiente: estabelecimento da Leishmania? Saliva

5 Introdução IV Vacinação com proteína da saliva protege contra a leishmaniose. (Valenzuela et al., 2002). Vacinação com DNA que codifica a mesma proteína protege contra a leishmaniose.

6 Objetivo do Projeto Estudar a saliva dos flebótomos Lutzomyia whitmani e Lutzomyia intermedia, os principais vetores da Leishmania braziliensis (espécie causadora da leishmaniose tegumentar) na Bahia. Identificar os componentes da saliva destes vetores. Hipótese: proteínas da saliva do vetor são capazes de proteger contra a leishmaniose causada por L. braziliensis.

7 Resultados alcançados Utilizando um modelo experimental de LTA: Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia. A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose. Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

8 A resposta imune contra a saliva é mista: indução de mediadores pró-inflamatórios e anti-inflamatórios. CD4 CD8 IFN  IL4 IL10 % % de células

9 Resultados alcançados Utilizando um modelo experimental de LTA: Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista. A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose? Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

10 A imunização com saliva não protege contra a leishmaniose. SGS

11 Resultados alcançados Utilizando um modelo experimental de LTA: Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista. A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose? Ñão. Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

12 Massive Sequencing of Full-Length Salivary Gland cDNA library Salivary gland cDNA database Sequence Analysis Select candidates and clone into VR2001

13 Assembler outputSequence Best match to NR protein databaseSpecies Average ResultStatus LI-contig7-asbLIM P5 B07SL1 proteinLu.longipalpisSIGVR2001 LI-contig13-asbLIL P3 B02SL1 proteinLu.longipalpisSIGVR2001 LI-contig14-asbLIS P9 E07D7 salivary proteinLu.longipalpisSIGVR2001 LI-contig17-asbLIS P9 F01anticoagulantLu.longipalpisSIGVR2001 LI-contig18-asbLIS P9 F05SL1 proteinLu.LongipalpisSIGVR2001 LI-contig25-asbLIL P2 C06SIGVR2001 LI-contig41-asbanticoagulantLu.longipalpisSIGincomplete LI-contig43-asbLIL P4 A03antigen 5-related proteinLu.longipalpisSIG LI-contig44-asbLIM P6 F11 SIGVR2001 LI-contig45-asbLIL P2 H08 SIGVR2001 LI-contig49-asbLIM P6 G12anticoagulantLu.longipalpisSIGVR2001 LI-contig53-asbLIL P2 E05SL1 proteinLu.longipalpisSIGVR2001 LI-contig60-asbLIS P8 B10gastric mucin (clone PGM-2A) SIG LI-contig62-asb putative yellow related- proteinLu. longipalpisSIGincomplete LI-contig73-asbLIS P9 C10 SIGVR2001 LI-contig85-asbputative apyraseLu. longipalpisSIGincomplete LI-contig100-asbLIS P8 C09 putative yellow related- proteinLu. longipalpisSIGVR2001 LI-contig103-asbLIS P9 G07 SIGVR2001

14 Conclusão I Divulgação: Publicações de Moura TR, Novais, FO, Oliveira, F, Clarencio, J, Noronha, A, Barral, A, Brodskyn C, de Oliveira CI. Toward a novel experimental model of infection to study American cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania braziliensis. Infect. Immun. (2005) 73: Saliva de Lu. intermedia: Resposta imune em camundongos e ausência de proteção contra desafio com L. braziliensis. Resposta inflamatória induzida pela saliva: modelo da bolsa de ar.

15 Conclusão I Divulgação: Publicações Intraspecific polymorphisms of Brazilian isolates of Leishmania amazonensis revealed by DNA sequencing, PCR-based analyses and molecular karyotyping. J.P.C. de Oliveira et al., enviado para publicação. Acta Tropica. Involvement of TCR V12 in the human immune response against Leishmania amazonensis. J. Clarêncio et al., aceito para publicação. Infec. Immun.

16 Conclusão II Impactos: Formação de recursos humanos Iniciação Científica: Fernanda Novais (concluído) Marcia Weber (em andamento) Renata Andrade (em andamento) Mestrado: Tatiana de Moura (concluído) João Paulo S. C. de Oliveira (concluído) Fernanda Novais (em andamento) Maria José Menezes (em andamento) Sarah Falcão (em andamento) Doutorado: Tatiana de Moura (em andamento)

17 Agradecimentos Fiocruz – Dra. Aldina Barral et al. FAPESB – Bolsa de Pos Doc. NIAID – Dr. Jesus Valenzuela.


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