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Introdução ao delineamento experimental Prof. Dr. Vinicius Campos Disciplina de Bioestatística e Delineamento Experimental Graduação em Biotecnologia -

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Apresentação em tema: "Introdução ao delineamento experimental Prof. Dr. Vinicius Campos Disciplina de Bioestatística e Delineamento Experimental Graduação em Biotecnologia -"— Transcrição da apresentação:

1 Introdução ao delineamento experimental Prof. Dr. Vinicius Campos Disciplina de Bioestatística e Delineamento Experimental Graduação em Biotecnologia - UFPel

2 1. O Que são experimentos e para que servem 2. Planejamento de experimentos 3. Execução de experimentos 4. Análise e interpretação dos resultados Abordagens da aula...

3 O que é um experimento? Um experimento é um teste feito para validar uma hipótese A experimentação razão pela qual nós estamos onde estamos

4 Reflita e estude sobre o experimentoPublique os resultados Seja critico com seus dadosBoa reputação O que um experimento propicia para o pesquisador O que um experimento propicia para o pesquisador

5 Planejamento do experimento Um experimento é igual à um crime Nunca será perfeito

6 Planejamento do experimento Mas como driblamos este problema? Definindo objetivos específicos

7 1.Defina a pergunta 2.Esboce o experimento – Variáveis experimentais – Controles – Número de amostras e repetições do exp. – Estatística 3.Organize o experimento 4.Realize o experimento 5.Colete e analise os dados Planejamento do experimento

8 Não pensar sobre a necessidade do exp. Planejar experimentos grandes Esquecer dos controles Não verificar se todos os reagentes estão disponíveis Não verificar se a estrutura do laboratório é suficiente para a execução do experimento Não saber como é feita a coleta e análise dos dados Erros comuns no planejamento

9 Buscar leitura sobre experimentos semelhantes/metodologias – Buscar protocolos – Entrar em contato com pesquisadores Ler poucos artigos no início – Artigos em português e depois em inglês Buscar artigos sobre o tema uma vez por semana Referencial teórico

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14 Controles experimentais – Marcador de peso molecular de DNA Controles de tratamento – Positivos ou negativos Controles positivos - soro sabidamente contaminado Controles negativos – soro sabidamente não-contaminado Controles

15 Intervalos de tempo – Expressão gênica em 0, 2, 4, 8, 16 h após o tratamento com IGF-1 em células tumorais em cultivo Controles

16 O que fazer se não der para fazer os controles? Alguns controles podem ser excluídos nesta ordem: 1.Controles de procedimento 2.Duplicatas de controles experimentais Se tiver que excluir outros controles desista do experimento!!! Controles

17 Cuidados com as normas de cada técnica Rigidez na repetibilidade Use protocolos estabelecidos Execução do experimento

18 1.Obtenha o protocolo 2.Leia o protocolo e veja se ele faz sentido 3.Prepare os reagentes listados no protocolo, verifique e reserve os equipamentos necessários 4.Siga o protocolo exatamente na primeira vez 5.Modifique o protocolo baseado na sua experiência com ele Execução do experimento - protocolos

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20 Protocolos

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22 Coleta dos dados – Saiba que tipo de resultado você está coletando!!! Exemplo: Avaliação da produção de ROS em oócitos maturados in vitro Técnica: coloração dos oócitos com 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína – corante fluorescente Resultado: ???? Coleta e análise dos dados

23 Oócitos corados com 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína

24 Intensidade de fluorescência dos oócitos corados

25 Estatística – Comparação dos dados – Cálculos para testar se a diferença entre os dados é devida ao tratamento ou é meramente ao acaso – Identificar previamente que teste estatístico será usado para comparar o tipo de dados que será obtido – Usar softwares estatísticos Análise dos dados

26 Os dados deverão ser resumidos e organizados para apresentação e futura publicação – Em tabelas – quando é importante a apresentação dos valores – Em gráficos – apresentação distribuições, tendências ou relacionamento entre variáveis Apresentação dos dados

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28 Intensidade de fluorescência dos oócitos corados

29 O experimento funcionou? – controles Quais são os resultados? - análise O que o experimento significa? - discussão Outros investigadores vão entender o experimento? - pergunte O resultado pode ser repetido? – faça novamente Interpretação de resultados

30 O experimento NÃO funciona!!! Checar os equipamentos Checar os reagentes Refaça parte do experimento Refaça todo o experimento Pense em trocar de experimento Geralmente as idéias precedem a tecnologia disponivel

31 O experimento funciona!!! Escreva e publique os resultados imediatamente!!! Deposite uma patente de invenção!!!

32 Prof. Dr. Vinicius Farias Campos Graduação em Biotecnologia


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