Introdução ao delineamento experimental

Apresentação em tema: "Introdução ao delineamento experimental"— Transcrição da apresentação:

1 Introdução ao delineamento experimental
Prof. Dr. Vinicius Campos Disciplina de Bioestatística e Delineamento Experimental Graduação em Biotecnologia - UFPel

2 Abordagens da aula... 1. O Que são experimentos e para que servem
2. Planejamento de experimentos 3. Execução de experimentos 4. Análise e interpretação dos resultados

3 Um experimento é um teste feito para validar uma hipótese
O que é um experimento? Um experimento é um teste feito para validar uma hipótese A experimentação razão pela qual nós estamos onde estamos

4 O que um experimento propicia para o pesquisador
Reflita e estude sobre o experimento Publique os resultados Seja critico com seus dados Boa reputação

5 Planejamento do experimento
Um experimento é igual à um crime Nunca será perfeito

6 Planejamento do experimento
Mas como driblamos este problema? Definindo objetivos específicos

7 Planejamento do experimento
Defina a pergunta Esboce o experimento Variáveis experimentais Controles Número de amostras e repetições do exp. Estatística Organize o experimento Realize o experimento Colete e analise os dados

8 Erros comuns no planejamento
Não pensar sobre a necessidade do exp. Planejar experimentos grandes Esquecer dos controles Não verificar se todos os reagentes estão disponíveis Não verificar se a estrutura do laboratório é suficiente para a execução do experimento Não saber como é feita a coleta e análise dos dados

9 Referencial teórico Buscar leitura sobre experimentos semelhantes/metodologias Buscar protocolos Entrar em contato com pesquisadores Ler poucos artigos no início Artigos em português e depois em inglês Buscar artigos sobre o tema uma vez por semana

10 Referencial teórico

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12 Referencial teórico

13 Referencial teórico

14 Controles Controles experimentais Controles de tratamento
Marcador de peso molecular de DNA Controles de tratamento Positivos ou negativos Controles positivos - soro sabidamente contaminado Controles negativos soro sabidamente não-contaminado

15 Controles Intervalos de tempo
Expressão gênica em 0, 2, 4, 8, 16 h após o tratamento com IGF-1 em células tumorais em cultivo

16 Se tiver que excluir outros controles desista do experimento!!!
O que fazer se não der para fazer os controles? Alguns controles podem ser excluídos nesta ordem: Controles de procedimento Duplicatas de controles experimentais Se tiver que excluir outros controles desista do experimento!!!

17 Execução do experimento
Cuidados com as normas de cada técnica Rigidez na repetibilidade Use protocolos estabelecidos

18 Execução do experimento - protocolos
Obtenha o protocolo Leia o protocolo e veja se ele faz sentido Prepare os reagentes listados no protocolo, verifique e reserve os equipamentos necessários Siga o protocolo exatamente na primeira vez Modifique o protocolo baseado na sua experiência com ele

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20 Protocolos

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22 Coleta e análise dos dados
Coleta dos dados Saiba que tipo de resultado você está coletando!!! Exemplo: Avaliação da produção de ROS em oócitos maturados in vitro Técnica: coloração dos oócitos com 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína – corante fluorescente Resultado: ????

23 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína
Oócitos corados com 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína

24 Intensidade de fluorescência dos oócitos corados

25 Análise dos dados Estatística Comparação dos dados
Cálculos para testar se a diferença entre os dados é devida ao tratamento ou é meramente ao acaso Identificar previamente que teste estatístico será usado para comparar o tipo de dados que será obtido Usar softwares estatísticos

26 Apresentação dos dados
Os dados deverão ser resumidos e organizados para apresentação e futura publicação Em tabelas – quando é importante a apresentação dos valores Em gráficos – apresentação distribuições, tendências ou relacionamento entre variáveis

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28 Intensidade de fluorescência dos oócitos corados

29 Interpretação de resultados
O experimento funcionou? – controles Quais são os resultados? - análise O que o experimento significa? - discussão Outros investigadores vão entender o experimento? - pergunte O resultado pode ser repetido? – faça novamente

30 O experimento NÃO funciona!!!
Checar os equipamentos Checar os reagentes Refaça parte do experimento Refaça todo o experimento Pense em trocar de experimento Geralmente as idéias precedem a tecnologia disponivel

31 O experimento funciona!!!
Escreva e publique os resultados imediatamente!!! Deposite uma patente de invenção!!!

32 Prof. Dr. Vinicius Farias Campos
Graduação em Biotecnologia