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MONOGRAFIA: EFEITO DA OUABAÍNA NA RECICLAGEM DE VESÍCULAS SINÁPTICAS EM JUNÇÃO NEUROMUSCULAR Aluna: Luciana Ferreira Leite Orientadora: Profª. Dra. Cristina.

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1 MONOGRAFIA: EFEITO DA OUABAÍNA NA RECICLAGEM DE VESÍCULAS SINÁPTICAS EM JUNÇÃO NEUROMUSCULAR Aluna: Luciana Ferreira Leite Orientadora: Profª. Dra. Cristina Guatimosim Fonseca Laboratório de Biologia da Neurotransmissão

2 JUNÇÃO NEUROMUSCULAR DE RÃ

3 Ca ++ RECICLAGEM DE VESÍCULAS SINÁPTICAS Abreu, B.J.

4 RECICLAGEM DE VESÍCULAS SINÁPTICAS

5 /~w3bio315/RME.htm rodin_home.html RECICLAGEM DE VESÍCULAS SINÁPTICAS

6 Royle and Lagnado, 2003

7 + Positive head Lypophilic tail bridges FM1-43 STAINING Abreu, B.J.

8 FM1-43 STAINING Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min

9 FM1-43 STAINING Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min

10 FM1-43 DESTAINING Abreu, B.J.

11 COMPOSTOS QUE AFETAM A RECICLAGEM α-Latrotoxina (Ceccarelli & Hurlbut, 1980; Henkel & Betz,1995)

12 COMPOSTOS QUE AFETAM A RECICLAGEM α-Latrotoxina (Ceccarelli & Hurlbut, 1980; Henkel & Betz,1995) Propionato e Acidificação (Lindgren et al, 1996)

13 COMPOSTOS QUE AFETAM A RECICLAGEM OUABAÍNA OUABAÍNA (Adam-Vizi & Ligeti, 1984; Haimann et al, 1985; Prado et al, 1990; Prado et al, 1993; Lomeo et al, 2003). α-Latrotoxina (Ceccarelli & Hurlbut, 1980; Henkel & Betz,1995) Propionato e Acidificação (Lindgren et al, 1996)

14 OBJETIVOS Objetivo geral - Investigar o efeito da ouabaína na reciclagem de vesículas sinápticas in vivo

15 Objetivos específicos Objetivos específicos - Padronizar a técnica de marcação de terminais axônicos com a sonda fluorescente FM Investigar o efeito da ouabaína na exocitose de vesículas sinápticas. - Investigar o efeito da ouabaína na endocitose de vesículas sinápticas. - Investigar se a ação da ouabaína é dependente de cálcio extracelular. OBJETIVOS

16 RESULTADOS Marcação e desmarcação dos terminais nervosos com estímulo elétrico A B C 1 terminação / 6 spots

17 RESULTADOS Efeito da ouabaína na marcação de terminais nervosos Estímulo elétrico Ouabaína

18 RESULTADOS Efeito da ouabaína na exocitose de vesículas sinápticas 34 spots 6 terminações

19 RESULTADOS O efeito da ouabaína na exocitose de vesículas sinápticas é dependente de cálcio extracelular? 68 spots 12 terminações

20 RESULTADOS Efeitos da ouabaína:

21 RESULTADOS Efeitos da ouabaína: Bloqueia a endocitose

22 RESULTADOS Efeitos da ouabaína: Bloqueia a endocitose Promove a exocitose

23 RESULTADOS Efeitos da ouabaína: Bloqueia a endocitose Promove a exocitose O efeito da ouabaína é independente de cálcio extracelular

24 PERSPECTIVAS...

25 AGRADECIMENTOS...

26 OBRIGADA PELA ATENÇÃO!


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