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PublicouCauê Salvador Alterado mais de 10 anos atrás
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Genômica É a caracterização de genomas inteiros. Tenta compreender a organização molecular e as informações que ela traz
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Genômica Genômica estrutural: caracteriza a natureza física dos genomas. É o sequenciamento de DNA. Genômica funcional: caracteriza o transcriptoma, ou seja toda a gama de transcritos produzidos por um determinado organismo (compara cDNA com o DNA). Proteoma: caracteriza toda a gama de proteínas codificadas
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Projetos genômicos: aplicações práticas
Compreensão dos princípios do design dos organismos Descoberta de novos genes Descoberta do controle gênico de doenças Elucidação dos processos evolutivos Elaboração de técnicas de diagnósticos de doenças
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Visão geral da genômica estrutural
Mapa cromossômico em níveis crescentes de resolução
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Marcadores genéticos e como são obtidos
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Fazendo uma biblioteca de DNA
Animação do CD
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Avaliando polimorfismos
A coleta do DNA A coleta e a extração do DNA Fazendo gel de eletroforese DNA figerprint
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Fazendo cópias de uma sequencia de DNA
Clonagem em plasmídeo PCR - síntese enzimática in vitro de milhões de cópias de um segmento específico de DNA, através de amplificação em ciclos, na presença da enzima DNA polimerase E para se divertir aprendendo...
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Avaliação de polimorfismos
DNA figerprint RAPD (Random Amplification of Polymorphic DNA = DNA polimórfico amplificado aleatoriamente) é basicamente uma variação do protocolo da PCR com duas características distintas: utiliza uma sequência iniciadora única e pequena ao invés de um par de “primers” e esta tem seqüência arbitrária, portanto sua seqüência alvo é aleatória SSLP (Simple Sequence Length Polymorphism = polimorfismos de comprimento de sequencias curtas) Minisatélites (repetições em tendem (VNTR) de ~25pb) Microsatélites (repetições de 1 a 4pb sendo a mais comum CA e seu complemento GT) RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) - Envolve a clivagem do DNA por enzimas de restrição, a separação por eletroforese, em gel de agarose ou poliacrilamida, dos fragmentos gerados na clivagem e sua visualização em forma de bandas. PCR e RFLP são muito utilizados nas pesquisas de variabilidade genética de populações
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SSLP - Minisatélites (repetições em tendem (VNTR) de ~25pb)
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Aplicação forense de polimorfismo como minisatélites
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SSLP – Microsatélites (repetições de 1 a 4pb sendo a mais comum CA e seu complemento GT)
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RAPD (utiliza uma sequência iniciadora única e pequena ao invés de um par de “primers” e esta tem seqüência arbitrária, portanto sua seqüência alvo é aleatória)
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Sequenciamento do DNA O método Dideoxi
Sequenciamento automático com corantes fluorescentes
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