TRANSCRIÇÃO PROF: DIOGO SILVA

Transcrição????? Síntese de uma molécula de RNA; Utiliza o DNA como molde.

RNA transportador (tRNA). CLASSES DE RNA RNA ribossomal (rRNA). RNA mensageiro (mRNA). RNA transportador (tRNA). OUTRAS CLASSES: RNA pequenos nucleares (snRNA) Snurps  proteínas + snRNA (pequeno ribonucleoproteínas nucleares) Converter RNA pré-mensageiro  mRNA RNA pequeno Nucleolares ( snoRNA) Processamento do RNA ribossomal. Pequenos RNA citoplasmático.

Tipos de RNA RNA transportador

Transcrição: Síntese de RNA a partir de um molde de DNA Parecido com a replicação Pequenas partes do DNA são transcritas (genes) Genes são transcritos quando seus produtos são necessários (seletivos) Necessário para Transcrição: Um molde de DNA; Substrato (nova molécula de RNA - trifosfato de ribonucleosídeo) Proteína e Enzimas Catalisadoras (RNA Polimerase)

Trifosfato de Ribonucleosídeo Componentes da transcrição

Informações contidas no DNA (unidade de transcrição)!!!!! Molde Único filamento de DNA Replicação x Transcrição Filamento molde ( usado para transcrição) Filamento não molde (não transcrito) Único gene  1 filamento Genes diferentes  de um ou pelos 2 filamentos Unidade de transcrição  trecho do DNA que codifica RNA. Onde começa e quando para ??? Qual filamento do DNA ler ??? Informações contidas no DNA (unidade de transcrição)!!!!!

Unidade de Transcrição: Regiões Promotor (Iniciador) Sequência Codificante de RNA Finalizador O promotor: Sequência de DNA; Reconhecida pelo aparelho de transcrição (ligação); Indica o filamento molde e o sentido; Indica o início da transcrição (nucleotídeo). Região Codificante de RNA Sequência do DNA que será copiada para RNA.

Finalizador Sequência de nucleotídeo; Determina a parada; Também é transcrito. Para a síntese é preciso Substrato Trifosfatos de ribonucleosídeos (rNTPs) 5´3´ 3´-OH Aparelho de Transcrição Enzima RNA Polimerase. Catalisador

Unidade de Transcrição Regiões envolvidas na transcrição

RNA Polimerase Bacteriana: Catalisador Apresenta 1 tipo Síntese  mRNA / tRNA / rRNA Cerne da enzima: cadeias polipeptídicas; 4 Unidades: duas α , β e β´. Fator Sigma ( δ )  Controla a ligação polimerase com o promotor. Fator Sigma ( δ ) + Cerne da enzima  Holoenzima

RNA Polimerase Eucarióticas 3 tipos de RNA Polimerase (Grandes e constituídas por várias unidades) RNA Polimerase I  rRNA RNA Polimerase II  pré-mRNA / snoRNA / snRNA. RNA Polimerase III  tRNA e RNA pequenos

Transcrição Bacteriana 3 fases: Iniciação Alongamento Término Iniciação: 1° Reconhecimento do promotor 2° Formação da bolha de transcrição 3° Ligações do rNTPs 4° Saída do aparelho de transcrição do promotor

Iniciação Aparelho de transcrição  ligação com o promotor (seletivo). Determina o filamento e as sequência da transcrição. Holoenzima reconhece a sequência do promotor -35 (TTGACA) e -10 (TATAAT). Reconhecimento  deselicoidização DNA (do ponto -10 até +17) Síntese inicial de RNA RNA polimerase  ligação com rNTPs Não é necessário primer para a síntese Adição rNTPs a ponta 3´. A ponta 5´ mantém P~P~P.

Reconhecimento do Promotor

Alongamento Progressão da bolha de transcrição Fechamento da região do DNA transcrita Ação das topoisomerases Término Com a transcrição do finalizador RNA polimerase deve parar a síntese Liberação da fita de RNA da RNA polimerase Liberação da fita de RNA da fita de DNA Liberação da RNA polimerase do DNA

Término Finalizadores (2 tipos) Finalizadores dependentes de rô: Proteína do fator rô. Ação igual a helicase. Finalizadores indenpendentes de rô: Sem a presença de rô Repetição invertida (Grampo)  bloqueio da RNA polimerase DNA 6 nucleotídeos de Adenina (A)  transcreve 6 Uracil (U) Liberação das fitas DNA – RNA.

Independente de rô Dependente de rô

Transcrição Eucariótica Similar a bacteriana Diferenças: 3 RNA polimerases (I, II e III) RNA polimerase  específica para o promotor RNA polimerase  transcreve um tipo de RNA. Muitas proteínas relacionadas a transcrição.

Transcrição e Nucleossomo A fita do DNA deve está acessível. DNA sofre modificações (cromatina) Ação da Acetiltransferase: Adiciona um grupo acetil na histona. Remodeladoras: Desloca nucleossomo de promotores.

Início da Transcrição Várias sequências de iniciação. 2 classes para o início: Promotores e Acentuadores. Promotores: Adjacente ao gene Ponto de início fixo Acentuador: Vários locais de início. Afeta a transcrição de genes distantes

Início da Transcrição Reconhecimento do promotor Proteína acessórias  ligação com o promotor Escolha da RNA polimerase I, II ou III (específico). Proteínas acessórias: Fator Geral de Transcrição + RNA Polimerase  Aparelho Basal de Transcrição Proteína Ativadora de Transcrição  estimula o Aparelho Basal de Transcrição

Promotores de RNA Polimerase II Transcreve genes codificantes de proteína Consiste regulador e cerne do promotor. Cerne do promotor Antecede o gene Sequência de reconhecimento do promotor: TATA box (TATAAA) TFIIB (G/C G/C G/C CG CC) Elemento iniciador (Inr) YYANT/ AYY Elemento posterior ao cerne RGA/TCGTG

Promotores de RNA Polimerase II Montagem do Aparelho Basal Início da transcrição RNA polimerase + mediadores (proteínas) ligação com o DNA Fatores de Transcrição (TFIIA, TFIIB, TFIID, TFIIF, TFIIH). TFIID Interação com RNA polimerase II. Proteína de ligação a TATA (TBP). liga-se a TATA box.

Término da Transcrição RNA Polimerase I Fator Rô RNA Polimerase III Sequência finalizadora RNA Polimerase II Pré-mRNA produz uma região de parada (região de consenso 3´)