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PublicouCássio Rios Bugalho Alterado mais de 8 anos atrás
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LIPASES Esterases que apresentam maior atividade por substratos insolúveis em água. Pertencem ao grupo das serina-hidrolases (EC ) Os triacilgliceróis são seus substratos naturais C O CH H
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Hidrólise de triacilgliceróis
O CH H Triacilglicerol Lipase O C C C C C C C C C Ácido graxo C C C C C HO C C C C C O CH H OH C Diacilglicerol
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Hidrólise de triacilgliceróis
O CH H OH C Diacilglicerol H Lipase C OH O Ácido graxo H O C HO CH OH Monoacilglicerol H
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Hidrólise de triacilgliceróis
O C HO CH OH Monoacilglicerol H Lipase O C Ácido graxo H HO C CH OH glicerol
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Reações catalisadas pelas lipases
Hidrólise: RCOOR’ + H2O ↔ RCOOH + R’OH Esterificação: RCOOH + R’OH ↔ RCOOR’ + H2O Transesterificação RCOOR’ + R”COOR’’’ ↔ RCOOR” + R’COOR”
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Estrutura tridimensional
Possuem no sítio ativo resíduo conservado: Gly-X-Ser-X-Gly. Sítio ativo se localiza dentro de uma cavidade hidrofóbica, onde irá se alojar o ácido graxo. A cavidade é protegida por uma tampa polipeptídica
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Especificidade das lipases
Regioseletividade: propriedade de reconhecer a mesma ligação química em diferentes regiões do substrato. Lipases não-específicas: hidrolisam igualmente ligações éster nas posições 1(3) e 2 do TAG. Lipases 1(3) específicas: hidrolisam ésteres primárias, nas posições 1(3) do triglicerídeo.
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Especificidade das lipases
Seletividade de substrato: propriedade de reconhecer o ácido graxo e hidrolisar ligações nas quais ele está envolvido. Tamanho da cadeia: ácidos graxos de cadeia curta (<10C), média (10 a 14C) ou longa (>16C). Grau de insaturação: selecionam entre ácidos graxos insaturados ou saturados. Reconhecem também a posição das duplas. Enantioseletividade: propriedade de reagir com um determinado isômero do substrato (D ou L).
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Especificidade das lipases
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Especificidade das lipases
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Fontes Animais: lipases pancreáticas Vegetais: sementes oleaginosas
Microrganismos: Candida antartica – lipases inespecíficas – Chyrozyme® Rhyzomucor miehei – lipases 1(3) específicas com preferência para AG de 12 carbonos - Lipozyme ®
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Rancidez hidrolítica Deterioração em alimentos gordurosos.
Hidrólise dos TAG, liberando ácidos graxos voláteis de sabor desagradável de ranço. Laticínios: ácido butírico (4C), capróico (6C) e caprílico (8C). Para evitar: inativar as lipases por branqueamento
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Maturação de queijos Lipases microbianas de Penicillium roquefortii, P. camembertii. Liberam ácidos graxos que conferem sabor, aroma e aparência específica. Lipases animais (pré-gástrica de cabritos): queijo parmesão
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Panificação Lipases: formam mono e diglicerídeos que têm propriedades emulsificantes Aumenta capacidade de retenção de ar na massa Produto mais fofo Aumenta capacidade de retenção de água, retardando a sinerese – aumento de vida de prateleira Permite a fabricação de pães light – os próprios lipídios da massa são transformados em agentes emulsificantes
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Síntese de aromas Aromas: ésteres voláteis de baixo peso molecular
Sintetizados por lipases a partir de um álcool e de um ácido - esterificação Podem ser considerados naturais Ex: butirato de etila e acetato de isoamila
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Produção de óleos e gorduras estruturados
São produtos que contêm triglicerídeos sintetizados artificialmente, para alterar as concentrações relativas de ácidos graxos e/ou suas posições. Vantagens nutricionais e funcionais Interesterificação entre triacilgliceróis RCOOR’ + R”OOR’’’ ↔ RCOOR” + R’COOR”
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Uso nutricional de óleos e gorduras estruturados
CH H OH Ácidos graxos de cadeia longa são mais prontamente absorvidos na forma de monoglicerídeos. Lipase pancreática é 1(3) epecífica. Melhor que estes ácidos graxos estejam na posição 2.
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Uso nutricional de óleos e gorduras estruturados
Betapol® (Unilever): equivalente de gordura do leite humano com valor muito próximo ao natural. Betapol® é uma mistura de triglicerídeos derivados de óleo vegetal, desenvolvida para contornar problemas associados com baixa absorção de ácidos graxos por lactentes, o que pode resultar em um impacto negativo no suprimento energético afetando o crescimento.
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Ácidos Graxos: PUFA (poliinsaturados)
Uso nutricional de óleos e gorduras estruturados Ácidos Graxos: PUFA (poliinsaturados) Papel essencial na nutrição humana Propriedades Biomédicas Nutricionistas recomendam a ingestão de DHA (docohexaenóico, 22:6) e EPA (eicosapentaenóico, 20:5) – ácidos graxos ω-3
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DHA e EPA de Óleo de Peixe (Enzymes in Lipid Modification, 2000)
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Uso tecnológico de óleos e gorduras estruturados
Substituintes da manteiga de cacau 80% da composição da gordura – ponto de fusão a 35 – 37o C (temperatura do corpo humano) Manteiga de cacau Palmítico (16:0) 25% Esteárico (18:0) 33% Oléico (18:1) 32% Linoléico (18:2) 3% Linolênico (18:3) 0,5% Produção a partir de óleos ricos em TAG com ácido oléico na posição 2 (azeite de oliva) e interesterifi-cação com óleos de ácido palmítico e esteárico com lipase 1 (3) específica. Produtos com sensação de derreter na boca Fornecimento instável e muito variável
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Produção de margarinas
Método convencional: hidrogenação catalítica Formação de ácidos graxos trans Método enzimático: Interesterificação de um óleo vegetal com uma gordura sólida (gordura de dendê) utilizando lipases.
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Ácidos Graxos cabeça polar Cauda apolar
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Propriedades físicas dos ácidos graxos e lipídios
As insaturações provocam curvaturas nas cadeias de carbono , fazendo com que as interações entre eles sejam mais fracas A livre rotação entre os carbonos faz com que a cadeia assuma conformação totalmente estendida, aumentando empacotamento, interações mais fortes. Ácidos graxos saturados de C12 a 24 têm consistência cerosa - gorduras Ácidos graxos insaturados com C12 a C 24 normalmente têm consistência líquido - óleos
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