Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum

Apresentação em tema: "Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum"— Transcrição da apresentação:

1 Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum
Universidade Estadual de Santa Cruz - UESC Departamento de Ciências Biológicas - DCB Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum Dr. Marcio G. C. Costa

2 fungos fitopatogênicos
Trichoderma Espécies de fungos Importância do gênero Secreção de grande quantidade de proteínas Atividade de biocontrole colonizadores de solo simbiontes de plantas antagonistas fungos fitopatogênicos

3 Trichoderma Atividade de biocontrole
Competição por nutrientes e espaço Antibiose Micoparasitismo Resistência induzida na planta hospedeira Redução da disseminação de esporos Supressão dos fatores de patogenicidade dos patógenos

4 Trichoderma Micoparasitismo Principal mecanismo de biocontrole
Envolve a produção de enzimas de lise da parede celular Etapas: Quimiotropismo Reconhecimento Ligação e enrolamento Penetração na parede celular e digestão do conteúdo celular do hospedeiro

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6 Trichoderma O mecanismo molecular pelo qual Trichoderma reconhece e ataca fungos fitopatogênicos é desconhecido, embora alguns determinantes deste mecanismo têm sido identificados

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8 Objetivo Verificar quais os produtos gênicos de Trichoderma envolvidos na interação com Crinipellis perniciosa utilizando uma abordagem proteômica

9 Trichoderma x Crinipellis
Histórico 1988 Isolamento de Trichoderma de vassouras secas de cacau em Belém, PA (Bastos, 1988) 1988 Identificado inicialmente como Trichoderma viride (Bastos, 1988) 1994 Identificado posteriormente como Trichoderma polysporum (Costa et al., 1996) 1995 Primeiro experimento de campo com Trichoderma na Bahia (Costa et al., 1996) 1999 Inauguração da Unidade de Biocontrole da CEPLAC/CEPEC 2000 Descrito como uma nova espécie de Trichoderma, T. stromaticum (Samuels et al., 2000) 2001 Avaliação de risco ecotoxicológico de T. stromaticum (Castro et al., 2001) 2002 Teste de campo com a nova formulação de T. stromaticum (Tricovab) 2003 Técnica de AFLP demonstrou a ocorrência de dois grupos genéticos distintos de T. stromaticum: Grupo I (Bahia) e Grupo II (Amazônia) (JT de Souza)

10 Biocontrole de C. perniciosa no Campo
Isolados de Trichoderma stromaticum utilizados nos experimentos Grupo genético Biocontrole de C. perniciosa no Campo Bom Ruim Grupo I (Bahia) 643 647 Grupo II (Amazônia) 56, 64 658

11 Curva de crescimento

12 Otimização do protocolo de extração de proteínas totais de T
Otimização do protocolo de extração de proteínas totais de T. stromaticum para aplicação em eletroforese bidimensional Protocolo Original Protocolo Otimizado

13 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelo isolado ALF 64 de T
Comparação do perfil de proteínas secretadas pelo isolado ALF 64 de T. stromaticum crescido em diferentes fontes de carbono pI 3,5 10 pI 3,5 10 97,0 66,0 45,0 14,4 20,1 30,0 kDa Glicose Quitina

14 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelos isolados ALF 64 e ALF 658 (GII) crescidos em quitina pI 3,5 10 pI 3,5 10 97,0 66,0 45,0 14,4 20,1 30,0 kDa ALF 64 ALF 658

15 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelos isolados ALF 643 e ALF 647 (GI) crescidos em quitina pI 3,5 10 pI 3,5 10 97,0 66,0 45,0 14,4 20,1 30,0 kDa ALF 643 ALF 647

16 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelos isolados ALF 64 (GII) e ALF 643 (GI) crescidos em quitina pI 3,5 10 pI 3,5 10 97,0 66,0 45,0 14,4 20,1 30,0 kDa ALF 643 ALF 64

17 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelo isolado ALF 658 crescido em quitina ou parede celular de C. perniciosa como fonte de carbono pI 3,5 10 pI 3,5 10 97,0 66,0 45,0 14,4 20,1 30,0 kDa Quitina Parede celular de C. perniciosa

18 Agradecimentos Estudantes: Candice M. B. Santos (IC, UESC)
Gislaine M. Coelho (IC, UESC) Fernanda B. Cupertino (AT, UESC) Grupo de Pesquisa em Genética e Biologia Molecular (UESC) Colaboradores: Alan Pomella (Almirante Cacau) Dr. Carlos R. Felix (UnB) Dra. Janice Lisboa de Marco (UnB) Dra. Karina P. Gramacho (CEPLAC) Financiamento: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB)