Andréa Lanzara Ianni Daniela Soares Mariana Lemos

Apresentação em tema: "Andréa Lanzara Ianni Daniela Soares Mariana Lemos"— Transcrição da apresentação:

1 Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan
Andréa Lanzara Ianni Daniela Soares Mariana Lemos Verônica Boeira Reina

2 Pseudomonas aeruginosa
-bactéria gram negativa, aeróbia, baciliforme -patógeno oportunista -infecções nosocomiais -sobrevive em muitos ambientes -resistência a muitos antibióticos e antisépticos -beta-lactamicos -aminoglicosideos -quinolonas

3 Introdução -infecção no trato urinário envolvendo P. aeruginosa (cepa IMCJ2.S1) resistente a vários medicamentos em um hospital do Japão -possui novo integron classe 1(In113) contendo 3 genes cassetes: Gene Metalo-β-lactamase(MBL) blaIMP-1 Gene aminoglicosídeo 6’-acetiltransferase aac(6’)-Iae Gene aminoglicosídeo 3’-adneliltransferase aadA1 - mutação nos genes gyrA e parC (substituição de aminoácidos) resistência a fluoroquinolonas

4 Material e Métodos - 13 hospitais do Japão - outubro de 2003 a setembro de 2004 - 284 isolados clínicos de P. aeruginosa -214 isolados clínicos - MDR 214 isolados - MDR 70 isolados - não MDR 72 – urina cateter urinário 18 – trato respiratório 5 – fezes 2 – ponta de cateter 2 – feridas 99/214

5 Material e Métodos Teste bioquímico - confirmação da identidade das espécies através de métodos colorimétricos com kit API20NE Sorotipagem – teste de aglutinação Suscetibilidade antimicrobiana – através do MIC50 e MIC90 Screening para produção de MBL (multiresistência a β-lactâmicos) Detecção imunológica de AAC(´6) – Iae – através da aglutinação com Ac conjugado PCR de integron classe 1 (já foi descrito previamente e a identificação do mesmo, na estrutura, caracteriza a multiresistência a drogas) PCR de QRDRs - identifica regiões determinantes de resistência a quinolonas LAMP (amplificação isotérmica de DNA) Sequenciamento de DNA Eletroforese em gel de campo pulsátil - PFGE

6 Resultados Sorotipagem
10 sorotipos identificados - O11, O1, O10, B, M, O4, O3, O6, O9, C 214 MDR O11 (99%) 70 não MDR – variável O1, O3, O4, O6, O9, O10, O11, B, C, M - O11 – predominante para MDR P. aeruginosa nesta população

7 Resultados Suscetibilidade Microbiana MDR P. aeruginosa
- Resistência - maioria dos isolados MDR P.aeruginosa apresentou resistência a todos os antimicrobianos - Sensibilidade Não MDR P. aeruginosa -Resistência – menos de 63%, exceto para STR ( 98,6%) Gentamicina (GEN) – 57,5% de resistência Polimixina B ( PL-B) – 28,0% de resistência

8 Resultados Screening para verificação de produção de MBL
- 214 MDR – 212 produziram MBL Detecção imunológica de AAC(6´)Iae

9 Resultados - 230/284 – positivo para integron classe1
Detecção de integrons classe 1 (PCR) - 230/284 – positivo para integron classe1 - 212/230 – apresentaram mesmo tamanho de banda comparado ao integron classe 1 In113 Resistência a fluorquinolonas GyrA -254/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParC -244/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido GyrB -70/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParE -30/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido

10 Resultados Análise do gene aac(6’)-Iae (Método de LAMP)
Laranja para verde = amplificação positiva 212/284 positivo Concordância com os resultados de PCR presença de gene aac (6’)-Iae – MDR cepas

11 Resultados PCR=LAMP

12 Resultados Genotipagem por PFGE
MDR P.aeruginosa 211/214 – cluster A – associação com a resistência a múltiplas drogas Não MDR P.aeruginosa genótipos variáveis

13 Discussão Demonstrou expansão clonal de MDR P. areuginosa em hospitais no Japão. Esta é a primeira descrição de um surto em larga escala de infecção nosocomial causada por um único clone de P. aeruginosa, com alto nível de resistência a um grande número de antibióticos.

14 Discussão A maioria dos isolados MDR testados (205 de 214) apresentavam sorotipo O11. Os sorotipos O11 e O12 tem sido mais associados com surtos de P. aeruginosa. Surtos de P. aeruginosa, sorotipo O11: – Estados Unidos; e 1995 – Grécia; - Recentemente: Bélgica e Japão Não se sabe porque estes dois sorotipos específicos estão envolvidos em mais surtos de P. aeruginosa.

15 Discussão Aac(6’)-Iae - bom candidato para marcador de infecção por MDR P. aeruginosa, já que 99% das MDR isoladas apresentaram o gene aac(6’)- Iae. Detecção de aac(6’)-Iae e seu produto: - LAMP (amplificação isotérmica do DNA): método simples e com alta especificidade; - Aglutinação com Ac-conjugado: menos específico, mas suficientemente preciso para detectar MDR de P. areuginosa.

16 Discussão MDR P. aeruginosa pode ter se espalhado no Japão devido ao crescente uso de carbapenemos, aminoglicosídeos e fluoroquinolonas. Vigilância nacional para MDR P. aeruginosa está sendo planejada. Medidas consideradas eficazes na prevenção de infecção nosocomial por P. aeruginosa em hospitais: Monitorar fontes ambientais de bactérias; Limpeza de locais contaminados; Revisão das medidas de controle de infecções no tratamento da urina.

17 Discussão Modo de transmissão de MDR P. areuginosa entre hospitais – desconhecido Transferência de pacientes infectados entre hospitais pode ser uma causa. 31 pacientes infectados com MDR P. areuginosa foram transferidos de outros hospitais para os hospitais participantes do estudo.

18 Análise Crítica Trabalho com uma quantidade grande de informações
Vários métodos de identificação e caracterização foram utilizados - estão dispostos de maneira ordenada na descrição de Materiais e Métodos; - em Resultados as informações ficaram um pouco dispersas, às vezes, trazendo confusão para o entendimento. Na discussão não houve aprofundamento dos assuntos abordados e não há uma conclusão finalizando esta discussão.