Isospora belli e Cryptosporidium parvum

Apresentação em tema: "Isospora belli e Cryptosporidium parvum"— Transcrição da apresentação:

1 Isospora belli e Cryptosporidium parvum

2 Isospora belli O oocisto imaturo contém um esporoblasto no seu interior, que e uma massa central representando o parasito. A maturação do oocisto depende das condições do meio ambiente (umidade, temperatura e oxigênio) e pode ocorrer em menos de 24 horas ou até em três dias, dando origem ao oocisto maduro

3 Isospora belli oocisto maduro contém dois esporocistos e quatro esporozoítos em cada esporocisto.

4 Ciclo de vida ESQUIZOGONIA: divisão nuclear seguida de divisão do citoplasma, constituindo vários indivíduos isolados simultaneamente. Existem três tipos de esquizogonia merogonia (produz merozoíto), gametogonia (produz microgametas) e esporogonia (produz esporozoítos).

5

6 Cryptosporidium parvum
Oocisto com 4 esporozoíto no seu interior

7 Ciclo de vida

8

9

10 Técnicas laboratoriais para coccídeos
O exame de fezes é feito após utilização de métodos de concentração ou emprego de métodos especiais de coloração, como, por exemplo: (ver De Carli-229) Método de Henriksen-Pohlenz Método de Kinyoun modificado (a frio) Método modificado de Ziehl-Neelsen ( a quente) Método modificado de safranina (a quente) Método modificado de Ziehl-Neelsen-Dimetilsulfóxido (DMSO) Obs: Tricrômico e hematoxilina férrica (não apresentam bons resultados) O diagnóstico pode, ainda, ser feito pela pesquisa de anticorpos circulantes e técnicas moleculares (PCR)

11 Coloração de Ziehl-Neelsen
Usado para corar o gênero Mycobacterium M. tuberculosis, M. bovis e M. avium M. Leprae Reações tintoriais próprias – são conhecidas com “álcool-ácido-resistentes” (B.A.A.R.) evidenciadas pela coloração de Ziehl-Neelsen. Coram-se pela mistura fucsina mais ácido fênico aquecido, que penetra no citoplasma e resistem à descoloração com uma mistura de ácido e álcool.

12

13 Procedimento Lâminas com esfregaço de escarro de paciente tuberculoso; Bateria de corantes de Ziehl-Neelsen: Fucsina: Dissolver 3g de fucsina básica em 10 ml de etanol 90%-95%, em seguida adicionar 90 ml de uma solução aquosa de fenol a 5% Álcool – ácido: Adicionar 3 ml de HCl concentrado em 97 ml de etanol a 90%-95%. Azul de Metileno: Dissolver 0.3 g de azul de meti leno em 100 ml de água destilada. Fixar a lâmina pelo calor (colocar a lâmina contendo o material na estufa pelo menos 01 hora,fixar também pelo calor, deixando esfriar).

14 Cobrir a lâmina com fuscina fenicada;
Aquecer até a emissão de vapores, sem deixar o corante secar, por 3 a 5 minutos; Lavar em água corrente; Em seguida descorar completamente com álcool-ácido; Lavar em água corrente novamente; Contracorar com azul de metileno por 30 segundos; Secar ao ar; Examinar a lâmina ao microscópio com objetiva de imersão.

15 Leitura e interpretação
Os B.A.A.R. apresentam-se como bastonetes finos, corados em vermelho, sobre fundo corado em azul.

16 Método Modificado de Ziehl-Neelsen (a quente)
para I. Belli e C. parvum Procedimento: Preparar o esfregaço com fezes frescas ou preservadas; Deixar secar a temperatura ambiente ou pelo calor (colocar a lâmina na estufa a 70°C por 10 minutos); Corar com fuscina-fenicada, aquecendo a lâmina até a emissão de vapores, por 5 minutos, sem deixar o corante secar ; Escorrer o corante e lavar em água corrente; Em seguida descorar com solução aquosa de ácido sulfúrico a 5% por 30segundos; Lavar em água corrente. Drenar; Contracorar com azul de metileno a 0.3% por 1 minuto; Lavar em água corrente novamente; Secar ao ar; Examinar a lâmina ao microscópio;

17 Oocisto de Isospora belli

18 Levar fezes para a próxima prática
Trazer para próxima aula modelos de laudos de EPF Já tiveram???? Pesquisa de Trichomonas vaginalis (colheita da amostra masculina e feminina; preservação da amostra; meios de transporte; exame microscópico a fresco e lâmina corada, colorações) Capítulo 8