CLONE População de células geneticamente idências Clone de um organismo: organismo geneticamente igual a outro organismo Mas pode falar-se de Clonagem de um gene: produção de múltiplas cópias de um gene Clone de um gene: células contendo moléculas idênticas de DNA recombinante, contendo o gene de interesse
CLONAGEM DE UM GENE – OBJECTIVOS? Sequência de DNA que codifica a proteína Produção de proteína recombinante Inserção do DNA clonado noutro organismo
Sequência de DNA que codifica a proteína – utilidade? Dedução da sequência de aminoácidos da proteína Comparação com a sequência de aminoácidos de outras proteínas Reconhecimento de domínios funcionais Previsão da função Previsão da estrutura Mutagénese Produção de anticorpos
Produção de proteína recombinante – utilidade? Aplicações na medicina e na biotecnologia Caracterização da proteína Produção de anticorpos Actividade da proteína Estrutura da proteína Interacções da proteína com outras macromoléculas
Clonagem de um gene: produção de múltiplas cópias de um gene VECTOR DE CLONAGEM
Características de um plasmídeo para que possa ser usado como vector de clonagem: Origem de replicação, que permite replicação eficiente do plasmídeo, para dezenas ou centenas de cópia por célula Gene que confere resistência a um antibiótico, que permite selecção das células contendo o plasmídeo Local de clonagem, com locais susceptíveis de clivagem por enzimas de restrição, para permitir inserção de fragmentos de DNA
Enzimas de restrição
Protein X Protein X Protein X