Introdução ao delineamento experimental Prof. Dr. Vinicius Campos Disciplina de Bioestatística e Delineamento Experimental Graduação em Biotecnologia - UFPel

Abordagens da aula... 1. O Que são experimentos e para que servem 2. Planejamento de experimentos 3. Execução de experimentos 4. Análise e interpretação dos resultados

Um experimento é um teste feito para validar uma hipótese O que é um experimento? Um experimento é um teste feito para validar uma hipótese A experimentação razão pela qual nós estamos onde estamos

O que um experimento propicia para o pesquisador Reflita e estude sobre o experimento Publique os resultados Seja critico com seus dados Boa reputação

Planejamento do experimento Um experimento é igual à um crime Nunca será perfeito

Planejamento do experimento Mas como driblamos este problema? Definindo objetivos específicos

Planejamento do experimento Defina a pergunta Esboce o experimento Variáveis experimentais Controles Número de amostras e repetições do exp. Estatística Organize o experimento Realize o experimento Colete e analise os dados

Erros comuns no planejamento Não pensar sobre a necessidade do exp. Planejar experimentos grandes Esquecer dos controles Não verificar se todos os reagentes estão disponíveis Não verificar se a estrutura do laboratório é suficiente para a execução do experimento Não saber como é feita a coleta e análise dos dados

Referencial teórico Buscar leitura sobre experimentos semelhantes/metodologias Buscar protocolos Entrar em contato com pesquisadores Ler poucos artigos no início Artigos em português e depois em inglês Buscar artigos sobre o tema uma vez por semana

Referencial teórico

Referencial teórico

Referencial teórico

Controles Controles experimentais Controles de tratamento Marcador de peso molecular de DNA Controles de tratamento Positivos ou negativos Controles positivos - soro sabidamente contaminado Controles negativos soro sabidamente não-contaminado

Controles Intervalos de tempo Expressão gênica em 0, 2, 4, 8, 16 h após o tratamento com IGF-1 em células tumorais em cultivo

Se tiver que excluir outros controles desista do experimento!!! O que fazer se não der para fazer os controles? Alguns controles podem ser excluídos nesta ordem: Controles de procedimento Duplicatas de controles experimentais Se tiver que excluir outros controles desista do experimento!!!

Execução do experimento Cuidados com as normas de cada técnica Rigidez na repetibilidade Use protocolos estabelecidos

Execução do experimento - protocolos Obtenha o protocolo Leia o protocolo e veja se ele faz sentido Prepare os reagentes listados no protocolo, verifique e reserve os equipamentos necessários Siga o protocolo exatamente na primeira vez Modifique o protocolo baseado na sua experiência com ele

Protocolos

Coleta e análise dos dados Coleta dos dados Saiba que tipo de resultado você está coletando!!! Exemplo: Avaliação da produção de ROS em oócitos maturados in vitro Técnica: coloração dos oócitos com 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína – corante fluorescente Resultado: ????

2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína Oócitos corados com 2', 7'- diacetato de diclorofluoresceína

Intensidade de fluorescência dos oócitos corados

Análise dos dados Estatística Comparação dos dados Cálculos para testar se a diferença entre os dados é devida ao tratamento ou é meramente ao acaso Identificar previamente que teste estatístico será usado para comparar o tipo de dados que será obtido Usar softwares estatísticos

Apresentação dos dados Os dados deverão ser resumidos e organizados para apresentação e futura publicação Em tabelas – quando é importante a apresentação dos valores Em gráficos – apresentação distribuições, tendências ou relacionamento entre variáveis

Intensidade de fluorescência dos oócitos corados

Interpretação de resultados O experimento funcionou? – controles Quais são os resultados? - análise O que o experimento significa? - discussão Outros investigadores vão entender o experimento? - pergunte O resultado pode ser repetido? – faça novamente

O experimento NÃO funciona!!! Checar os equipamentos Checar os reagentes Refaça parte do experimento Refaça todo o experimento Pense em trocar de experimento Geralmente as idéias precedem a tecnologia disponivel

O experimento funciona!!! Escreva e publique os resultados imediatamente!!! Deposite uma patente de invenção!!!

Prof. Dr. Vinicius Farias Campos Graduação em Biotecnologia fariascampos@gmail.com vcampos_ib@ufpel.edu.br